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时间:2020-03-14
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1、“纲举目张”释义,纲指鱼网上的总绳,目指网眼。把大绳子一提起来,一个个网眼就都张开。比喻抓住事物的关键,带动其他环节。第二章抗原抗体反应王雪萍华中科技大学同济医学院附属协和医院抗原抗体反应第一节抗原抗体反应原理第二节抗原抗体反应特点第三节抗原抗体反应影响因素第四节抗原抗体反应类型基本概念抗原:是能够刺激机体免疫系统诱导免疫应答,并能与相应免疫应答的产物(抗体或致敏淋巴细胞)在体内或体外发生特异性的结合反应的物质。抗体:是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一类能与相应抗原特异性结合的球蛋白。免疫球
2、蛋白的结构抗体的结构及其多样性抗原决定簇(epitope)1.抗原决定簇又称表位(epitope),是指抗原性物质表面决定该抗原特异性的特殊化学基团,是免疫应答和免疫反应具有特异性的物质基础。 2.抗原决定簇是很小的,其大小相当于相应抗体的结合部位,它们可由5-7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成。 3.抗原结合价:是指能与抗体分子结合的抗原决定簇的总数。每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇,而天然抗原含有很多不同的抗原决定簇,它是带有大量多种"天然"半抗原的大分子。是抗原和相应抗体之间的特异性结
3、合反应既可发生在体内,也可发生在体外一、抗原抗体结合力一、抗原抗体反应一、基本原理第一节抗原抗体反应原理Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性)分子表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生抗原抗体反应的二阶段性第一阶段为抗原抗体特异性结合阶段,反应速度快,几秒钟或几分钟即可完成,但不出现肉眼可见反应。第二阶段为可见阶段,表现为凝集、沉淀、补体结合等反应,本阶段有两个特点,一是反应进行慢,需要几分钟、几十分钟或更长。其二是受电解质、温度、酸碱度等多种因素影响。二、基本条件:结合力亲和力
4、和亲合力亲水胶体转化为疏水胶体抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力*1.静电引力*2.范德华引力*3.氢键结合力*4.疏水作用力静电引力(库伦引力)概念:抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力。引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比;平均键能约为20.9kJ/mo1。范德华引力概念:抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力。结合力的大小与两个相互作用基团的极化
5、程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比,键能约为4.2~12.5kJ/mol。这种引力的能量小于静电引力。具有特异性。概念:供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。氢键结合力供氢体:羧基、氨基和羟基受氢体:羧基氧、羧基碳和肽键氧等能的大小取决于氢键的方向:氢键具有高度的方向性。氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比,键能约20.9kJ/mol。疏水作用力(疏水键)概念:两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力。抗原决定簇与抗体上的结合点靠近,互相间正、负极性消失,亲
6、水层立即失去。此力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。提供的作用力最大,约占总结合力的50%。抗原抗体结合力示意图抗原抗体氢键结合力ONONHH静电引力--++范得华力-++-+--+疏水作用力排斥的水二、抗原抗体亲和力(affinity)*亲和力是抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应而结合的强度,这是抗原与抗体之间固有的结合力。亲和常数亲和常数K=K值大的抗体与抗原牢固结合,不易解离,说明该抗体有高亲和力。抗体与抗原结合是可逆的反应,在平衡时其K=K1/K2K:亲和常数K1:结合常数K2
7、:解离常数*亲合力(avidity)是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度。亲合力与亲和力、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。亲合力越大,抗原抗体结合越牢固。血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷,使极化的水分子在其周围形成水化层,成为亲水胶体。三、亲水胶体转化为疏水胶体当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后,与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为疏水胶体。在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体疏水胶
8、体转化NaCl可见反应第二节抗原抗体反应的特点特异性比例性可逆性阶段性一、特异性(specificity)*概念:抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。一、特异性*决定因素:由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。抗体分子N端可变区形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽沟,只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。特异性示意图*交叉反应(crossreaction)两种不同的抗原物质
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