2019-2020学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养课件 新人教版选修1.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养学习目标重点难点1.了解培养基的基本知识。2.学会无菌操作的基本知识。3.掌握制备牛肉膏蛋白胨的方法。4.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。重点：无菌操作的基本知识。难点：平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物的方法。1．概念：人们按照微生物对___________的不同需求，配制出供其__________的营养基质。课前预习·教材研读一、培养基［基础梳理］营养物质生长繁殖液体凝固剂固体3．成分：(1)主要成分：水、______、氮源、_______。(2)其他成分：还需要满足微生物生长对

2、_____、特殊营养物质(如维生素)以及_______的要求。碳源无机盐pH氧气(3)1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成：培养基组分提供的主要营养牛肉膏5.0g____________________________蛋白胨10.0g____________________NaCl5.0g________H2O定容至1000mL氢元素、氧元素碳源、氮源、磷酸盐和维生素碳源、氮源和维生素无机盐(4)某些微生物生长的特殊需求：培养的微生物需要满足的其他要求乳酸杆菌培养基中添加________霉菌将pH调至______细菌将pH调至_______

3、___________厌氧微生物需要提供______条件维生素酸性中性或微碱性无氧二、无菌技术1．目的：获得_______培养物。2．关键：防止____________的入侵。纯净外来杂菌3．两种无菌技术的比较：消毒灭菌作用强度较为_____的理化因素_____的理化因素作用程度杀死物体表面或内部的_______微生物杀死物体内外的_____微生物温和强烈部分所有芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭适用对象实验操作的空间、活体生物材料、操作者衣着和双手接种用具、玻璃器皿、培养基等常用方法______消毒法，_____消毒法、_________消毒法、_

4、______消毒法____灭菌法、_____灭菌法、________灭菌法煮沸巴氏化学药剂紫外线灼烧干热高压蒸汽三、培养基的制备1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤：计算↓依据培养基________的比例，计算配制100mL的培养基中各成分的用量称量↓牛肉膏比较黏稠，可用称量纸称量，牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，称取时动作要______，称后及时____________配方迅速盖上瓶盖溶化↓牛肉膏和称量纸＋水取出称量纸―→加_______和________―→加琼脂(注意：不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)―→补加_______至100

5、mL灭菌↓培养基：__________灭菌；培养皿：_____灭菌倒平板待培养基冷却至________左右时，___________附近倒平板蛋白胨氯化钠蒸馏水高压蒸汽干热50℃酒精灯火焰2．倒平板的操作程序：(1)将_________的培养皿放在________的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。(2)右手拿锥形瓶，使瓶口_______________。(3)用左手将培养皿打开一条______________的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。(4)等平板冷却凝固后，将平板____________

6、__。灭过菌火焰旁迅速通过火焰稍大于瓶口倒过来放置四、纯化大肠杆菌想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的_______，即获得较纯的菌种。1．平板划线法：(1)原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面_________的操作，将聚集的菌种逐步__________到培养基的表面。菌落连续划线稀释分散(2)步骤：①接种环灭菌：将接种环放在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。②取菌种：a．在酒精灯_________冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的_______。b．将试管口通过________达到消灭试管口杂菌的目的。c．将已________的接种

7、环伸入菌液中，沾取一环菌液。d．将试管口__________，并塞上棉塞。火焰旁棉塞火焰冷却通过火焰③平板划线：a．将皿盖打开一条缝隙，把沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划_________条平行线，盖上皿盖。注意________________。b．灼烧接种环，冷却后，从第一区域___________开始往第二区域内划线。重复以上操作，完成三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与_____________相连。三到五不要划破培养基划线的末端第一区划线④培养：将平板_______，放入培养箱中培养。2．稀释涂布平板法：(1)原理：将菌液

8、进行一系列的___________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。倒置梯度稀释(2)步骤：①系列稀释操作：a．101