环境雌激素中17β-雌二醇降解菌的筛选及其降解特性研究.pdf

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1、分类号：X172单位代码：10193密级：公开学号：20130229硕士学学位位论文环境雌激素中17β-雌二醇降解菌的筛选及其降解特性研究Screeninganddegradationcharacteristicsofdegradingbacteriaof17β-estradiolinEnvironmentalEstrogen作者姓名：林泳墨学位类别：硕士专业名称：环境工程研究方向：环境污染生物修复指导教师：李明堂副教授所在学院：资源与环境学院2016年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容

2、外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等

3、复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日导师签名：签字日期：年月日摘要近年来，由于畜禽养殖粪便处理的不当，各种工业生产的污废水随意排放，导致雌激素类污染物的肆意扩散，对环境和人类的生产生活产生影响。雌激素类污染物作为新型环境污染物，已成为环境研究的热点话题。而17β-雌二醇是典型的环境雌激素。本

4、文从长春市及周边地区的十余个畜禽养殖厂，在长期堆放粪便下的土壤、化粪池，粪尿池中采集得到50余样品，通过驯化富集，从中分离得到一组高效降解17β-雌二醇（E2）的复合菌。通过单株菌株以及复合菌对E2降解的比较实验得出最佳优势复合菌，对两株菌株进行鉴定，通过对环境影响因子的研究，分析复合菌的最佳生长条件，以及两种菌株混合比例。通过降解动力学拟合方程，确定最佳参数，对复合菌的降解机制进行初探，并将理论研究与实际应用相结合，研究结果如下：1、经过多次驯化培养与分离纯化，从采集的样品中筛选一组对E2有较高降解能力的复合菌。分别命名为LM1、LY1，通过VITEK2鉴定以及系统发育树基于16S

5、rRNA构建的系统发育树表明，菌株LM1和LY1与乙酸钙不动杆菌和假单胞菌相似性较高。2、将菌株LM1和菌株LY1与睾丸酮丛毛单胞菌（ATCC1196）对E2的降解进行比较，研究结果显示，在第8天左右，菌株LM1和菌株LY1生长均能达到稳定，OD600（细菌细胞密度）分别为0.52、0.541，而菌株ATCC1196在前8天生长都较为迟缓，在第11天生长进入稳定期，OD600达到0.571。在培养11天后，菌株LM1和菌株LY1降解E2的降解率分别为64.22%，78.24%，而菌株ATCC1196降解率为82.10%，说明菌株ATCC1196利用E2效果较好。3、将复合菌和单一菌株

6、对E2的降解效果进行比较研究，研究结果显示，复合菌LM1和LY1（MY）生长最快，OD600最高时为1.221，复合菌LM1、LY1和ATCC1196（MYA）的OD600最高时为0.886，菌株ATCC1196（AT）降解过程中，OD600最高达到0.571。在培养11天后测定E2浓度，复合菌MY降解E2的降解率为97.12%，复合菌MYA降解E2的降解率为94.7%，菌株AT降解E2的降解率为82.1%。实验结果表明，复合菌MY对E2的降解效果好于其他组合的复合菌，并且与单一菌株降解E2进行比较，复合菌MY对E2的降解能力也高于单一菌株对E2的降解能力，因此复合菌MY对E2的降解

7、有较高应用价值。4、E2不同浓度对复合菌MY的生长以及对E2降解的影响，研究结果显示，当E2添加浓度为1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L时，复合菌MY的OD600最I大分别为0.581、1.475、1.435、1.401，培养8天后E2降解率分别为99.31%、96.95%、93.12%、85.21%。实验结果表明，随着E2添加浓度的逐渐升高，复合菌MY降解E2的降解率逐渐下降。通过降解动力学拟合方程，与一级降解动力2学方程拟合效果最好，R