实验六红细胞渗透脆性测定、影响血液凝固的因素及血型鉴定.doc

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1、实验六红细胞渗透脆性测定、影响血液凝固的因素及血型鉴定一、红细胞渗透脆性的测定【实验目的】1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。【实验原理】将红细胞悬浮于等渗NaCl液屮，其形态不变。若叠于低渗NaCl溶液屮则发生膨胀破裂，此现象称为红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力，其人小可用NaCl溶液浓度的高低來表示。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，开始出现溶血现象的NaCl溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力（正常为0.42-0.46%NaCl溶液）。出现完全溶血现象时

2、的NaCl溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力（正常为0.28-0.32%NaCI溶液）。前者代表红细胞的最人脆性（最小抵抗力），后者代表红细胞最小脆性（最人抵抗力）。生理学上将能使悬浮于其屮的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液，不能跨过细胞膜的微粒所形成的力，但等渗溶液并不一定是等张溶液（如1.9%的冰索溶液）。【材料与方法】（一）实验对彖家兔（二）器械药品：试管架、小试管45支、载玻片、盖玻片注射器、8号注射针头、棉签，l%NaCl溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸锚水，1.9%冰素溶液、地塞米松、皂试。（三）方法与步骤1.配制不同浓度的低渗NaCl溶液取口

3、径相同的干洁小试管12支，分别编号排列在三个试管架上,按表8-1分别向各试管内加入l%NaCl溶液和蒸網水混匀，配制从0.68-0.24%12种不同浓度的NaCl低渗溶液，每管总最均为2.5mlo表8-1不同浓度低渗氯化钠溶液的配制试管编号试管编号试剂123456789101112l%NaCl(ml)1.71.61.51.41.31.21.11.00.90.80.70.6蒸溜水（ml）0.80.91.01」1.21.31.41.51.61.71.81.9NaCl浓度％0.680.640.600.560.520.480.440.400360.320.280

4、.24另取3支小试管,在三个试管架中分别编号13-15,分别加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5mlo2.采集标本家兔麻醉厉，仰卧固定于兔手术台上，分离一侧颈总动脉或股动脉插管备放血用（具体方法参见第章）。依次向15支试管内各加1滴，轻轻颠倒混均，切忌用力振荡。先观察13、14、15管的变化，其他12管在室温下放宜1小时。3.观察指标血液溶血情况，其现象可分为以下儿种：(1)试管内液体完全变成透明红色，说明红细胞完全破裂，称为完全溶血。(2)试管内液体下层为混浊红色，上层无色透明，表示部分红细胞没有破坏，称为不完全深血。(3)试管内液体

5、下层为混浊红色，上层无色透明，说明红细胞完全没有破坏。1.观察项日(1)观察不同浓度低渗NaCl混合液的颜色和透明度。(2)比较第-•个试管架第13、14、15管的溶血情况及第二、第三个试管架中与第一个试管架中对应试管的溶血情况并分析:其原因。［实验结试管号123456789101112131415现象【注意事项】1.每支试管内血液滴入景应准确无谋(只加一滴)。2.确保每支试管NaCl溶液的浓度准确、容量相等。3.试管必须清洁、T•燥。4.观察结果时应以白色为背景。【要求与思考】1.实验前要预习实验内容。2.复习和掌握生理学教材有关血液凝I古I、渗透压的

6、概念以及红细胞的形态、可舉变形性等基本知识。3.何谓等渗、等张溶液，红细胞的最大脆性、最小脆性、最大抵抗力和最小抵抗力？【作业题】1.为什么红细胞在等渗的冰索溶液中迅速发生溶血？2.测主红细胞渗透脆性有何临床意义？3.同一个体的红细胞的渗透脆性不一样，为什么？二、影响血液凝固的因素【实验目的】本实验以发生血液凝固的吋问为指标，向血液屮加入或去掉某些因索或改变某些条件(如温度等)，以观察对血液凝固的影响O【实验原理】血•液流出血管后很快就会凝I古I。血•液凝固分为内源性凝血系统与外源性凝血系统是指在组织因子的参与下血液凝I古I的过程。本实验直接从动物动脉放

7、血，由于血液儿乎没有和组织因子接触，其凝血过程主要由内源性凝血•系统所发动。血•液凝固受许多因索的影响，凝血因子可直接影响血液凝固过程。温度、接触面的光滑程度等也可影响血液凝固过程。【材料与方法】(%1)实验对彖家兔（二）器材药品小烧杯、带橡皮刷的玻棒或竹签（或小号试管刷）、清洁试管10支、秒表、水浴装直一套、冰块、棉花、石蜡汕、DT索或草酸钾、生理盐水。（三）方法与步骤1.动物准备家兔麻醉府，仰卧周定于兔手术台上，行一侧颈总动脉或股动脉插管，备取血用。2.试管的准备収8支T•净的小试管，按表8・2准备各种不同的实验条件。表8・2影响血液凝固的因素实验条

8、件实验结果（凝血时间）不加其它物质放棉花少许用右蜡汕润滑试管内表血保温于37°C