果蝇唾液腺染色体观察实验的改进.doc

《果蝇唾液腺染色体观察实验的改进.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、果蝇唾液腺染色体观察实验的改进《全口制屮学生物学教学大纲》明确规定：使学生掌握关于染色体、DNA和基因三者Z间的相互关系的知识以及基因的概念。笔者在高中生物学教学中利川果蝇三龄幼虫作实验材料，并对该实验步骤进行了一些探索和改进，在指导学生理解和掌握染色体、DNA与基因的相互关系的知识方曲，取得了较好的教学效果，具体作法如下：一、实验原理染色体的数量和形态特征跟生物体的性状遗传有着密切的关系，而染色体的形态特征又不易观察,科学家们发现果蝇三龄虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态。在幼虫发冇过程屮细胞核屮的DNA多

2、次复制，但细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体DNA也不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。加之睡液腺细胞屮同源染色体互相靠拢在一起呈现出一种联会状态，而使其比果蝇的其他体细胞屮的染色体粗1000-2000倍，长100〜200倍，在一般光学显微镜下就能清楚地看到，因此果蝇三龄幼虫是观察染色体理想的材料。二、材料器具果蝇三龄幼虫、尖锐的解剖针、银了、载玻片、盖玻片、解剖镜或有支架的放大镜、吸水纸、0.8%的生理盐水溶液、醋液洋红染液、清水。三、实验步骤1.材料的准备1）临时培养基的制备可以頁•接削去苹果的皮

3、并将苹果切成小块放入培养瓶（可用330mLo的空饮料瓶代替）屮即可，然后盖住瓶口，将培养瓶置于温暧处；2）招引果蝇成虫当瓶内苹果变色发酵麻，打开瓶口，很快就会发现有果蝇的成虫进入到瓶内培养基上生活，当瓶中出现约有10对左右的成虫时，用棉球塞住瓶口，于15〜16°C的条件下培养，接种12hjH,将成虫移出。重新用棉球塞住瓶口，控制成虫排卵的时间，以免产生过多的卵。果蝇的生活史为完全变态，在20°C条件下从卵到幼虫为8d,蛹期6d左右，整个生活史15d即可。20〜25。C是果蠅生活的适宜温度，因此果蝇一般培养在恒温箱内，盛夏时

4、要注意降温；3）果蝇幼虫的饲养当卵孵化成幼虫后要经过两次蜕皮才能从一龄幼虫发冇为三龄幼虫，一龄幼虫岀现后，毎天在培养基表面滴加2%酵母液（可用医院的干酵母片配制），二龄幼虫期应滴加5%的酵母液，滴加的量可以覆盖培养基表面薄薄的一层为宜，几天示就会发现有大量的三龄幼虫爬上瓶壁。三龄幼虫体长约5mm,头部稍尖，位于头部的口器为肉眼可见一小黑点，U器后面有一对透明的唾液腺。2.剥离睡液腺取洁净载玻片1张，在载玻片屮央滴一小滴0.8%的生理盐水，用解剖针挑取1条行动迟缓、肥大、已爬在瓶壁的三龄幼虫，放入载玻片上溶液左方，生理盐水不

5、宜过多，以减少幼虫活动。把载玻片放在解剖镜或放大镜下，左手持针固定虫体尾端，右手持针插入头部（外形似一个黑色小点）屮央向右稳拉，当拉出头部时，腺体随同内脏一起拉岀。如果头部拉断，腺体没拉出，可以用左手持£1•压住尾端，右手持针从腹部末端缓缓地向头端挤压，这样也可压出睡液腺。果晚的唾液腺是位于口器后端连在食道两侧的一对透明而微白的类似香蕉形的长形小囊，由单层细胞构成，细胞大、细胞核大，细胞轮劇清晰。用两个解剖针小心将唾液腺以外的构造切掉，并分离附看在上面的乳白色脂肪。用吸水纸小心去掉载玻片上的杂物和过多的水分，但T力不要接触

6、到实验材料，否则材料就容易被纸吸附而丢失。在载玻片屮央仅留下具有睡液腺的部分浸在生理盐水屮，操作的全过程都以上述的生理盐水保持唾液腺湿润。3.染色迅速向载玻片上唾液腺滴加1滴醋酸洋红染液，让唾液腺浸染3min。特别注意染色时不要让染液干掉，这对制出优良装片非常重要。1.压片当腺体染成红色后，用小块滤纸擦去染液周围的一圈黑色沉淀物并小心吸去腺体周围的染液，在腺体上滴上1滴清水，将盖玻片用辍子轻放在染好色的材料上，再覆以3层比盖玻片略大的吸水纸，用手掌用力压一下，并横向揉几次，用力和揉动是一个方向，不能來冋揉。压片时注意T方不

7、要移动盖玻片，以免把染色体推散影响观察，要把腺体细胞核压破，至玻片下呈很浅的粉红色为止，染色体伸展而不破碎为好。5•镜检、观察1）先在低倍镜下观察，可以看到在淡紫红色的细胞质屮有一些深紫红色的带形染色体，找到1个染色体清晰的细胞，移到视野的屮央；2）转动转换器，换上高倍物镜观察，调节反光镜和光圈，适当调节细准焦螺旋，就可以清晰地看到巨大染色体上显示出许多粗细明暗的横带。四、结果分析与讨论1.由于果蝇睡液腺细胞屮8条染色体Z问以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染屮心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色丿二可以观察到1个

8、染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。可以看到每个唾液腺细胞都有数条染色体，且每条染色体上有粗细不等的横纹，或叫做带。2•与传统制片法的主要区别1）配制染液时可放入一小铁钉，过lmin取出，使染色剂屮略具铁质，增进染色性能，缩短染色时间（仅需3min左右），而传统制片时染色时间需要l