几种培养基差异.doc

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1、几种培养基差异DMEM•高糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但乂不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤屮骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。DMEM-低糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含冇多种微量元素,和DMEM以1结合,称为DMEM/F1

2、2培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含冇较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。DMEM/F12添加了谷氨酰胺几种胶原酶差异:胶原酶的分类和用途点击次数:502发布时间:2011-11-17胶原酶背景介绍胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋

3、结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽抱杆菌提取制备的,主要水解结缔组织屮胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这吋可采用胶原酶解离细胞法。胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为最终浓

4、度200U/ml(约为lmg/mL咸0.03%~0.3%。胶原酶分为I、II、IILIV、V型以及肝细胞专用胶原酶,耍根据所耍分离消化的组织类型选择胶原酶类型。1、胶原酶I用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶II适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织。3、胶原酶IV包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。4、胶原酶V包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,将结缔组织分

5、离成单个细胞。胶原酶的配置:胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制、消毒灭菌和储藏。注意:因为I型胶原酶分子颗粒比胰酶大,不容易过滤,因此可以用蔡式滤器过滤除菌。钙、镁离子和血清成分不会影响胶原酶的消化作用,因而可用BSS(如D-hanks或者PBS)或含血清的培养液配制。儿种胶原酶的区别2009-07-2710:20胶原酶产品编号规格价格C8140-100100mg440.00说明:胶原酶I用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。别名:ClostridiopeptidaseACAS#:9001-12-1外观:棕色或棕褐色结晶

6、性粉末R:36/37/3&42S:22-24-26-36/37储存条件:・20°CFromSigmaC0130胶原酶II宣IS;产品编号规格价格C8150-100100mg440.00说明:胶原酶II适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细胞的分离。别名:ClostridiopeptidaseACAS#:9001-12-1外观:棕色或棕褐色结晶性粉末R:36/37/38-42S:22-24-26-36/37储存条件:・20°CFromSigmaC6885胶原酶III产品编号规格价格C8490-15001500u(原装

7、)3650.00说明:用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动物组织细胞解离。别名:ClostridiopeptidaseACAS#:9001-12-1外观:冻干粉胶原消化活力:400u/mg固体来源:ClostridiumhistolyticumR:36/37/38・42S:22-24-26-36/37储存条件:?20°CFromSigmaC0255CollagenaseIV胶原酶IV产品编号规格价格C8160-100100mg440.00说明:胶原酶IV包含至少7屮蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等

8、。它能消化多种组织。别名:ClostridiopeptidaseACAS#:9001-12-1外观:棕色或棕褐色结晶性粉末R:36/37/38-42S:22-24-26-36/37储存条件:・20°CFromSigmaC5138CollagenaseV胶原酶V产品编号规格价格C8170-100100mg780.00说明:胶原酶V包

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