生物技术制药课后习题答案.doc

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1、第一章绪论1生物技术是以生命科学为基础，利用生物体（或生物组织、细胞及其组分）的特性和功能，设计构建有预期性状的新物种或新品系，并与工程相结合，进行加工生产，为社会提供商品和服务的一个综合性的技术体系。2生物技术的主要内容：P1基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程蛋白质工程：运用基因工程全套技术改变蛋白质结构的技术。染色体工程：探索基因在染色体上的定位，异源基因导入、染色体结构改变。生化工程：生物反应器及产品的分离、提纯技术。3生物技术制药采用现代生物技术人为创造条件，借助微生物、植物或动物来生产所需的医药品过程被称为4生物技术药物采用DNA重组技术或其它生物

2、新技术研制的蛋白质或核酸类药物才能被称为5生物药物生物技术药物与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为PPT复习题第二章基因工程制药1、简述基因工程制药的基本程序。P162、说明基因工程技术用于制药的三个重要意义。P15第一段第一行3、采用哪两种方法来确定目的cDNA克隆？P18（7目的基因cDNA的分离和鉴定）①核酸探针杂交法用层析法或高分辨率电泳技术(蛋白质双向电泳技术或质谱技术)分离出确定为药物的蛋白质，氨基酸测序，按照密码子对应原则合成出单链寡聚核苷酸，用做探针，与cDNA文库中的每一个克隆杂交。这个方法的关键是分离目的蛋白，②免疫反应

3、鉴定法（酶联免疫吸附检测）4、说明用大肠杆菌做宿主生产基因工程药物必须克服的6个困难。①原核基因表达产物多为胞内产物，必须破胞分离，受胞内其它蛋白的干扰，纯化困难；②原核基因表达产物在细胞内多为不溶性(包含体,inclusionbody)，必须经过变性、复性处理以恢复药物蛋白的生物学活性，工艺复杂；③没有翻译后的加工机制，如糖基化，应用上受到限制；④产物的第一个氨基酸必然是甲酰甲硫氨酸，因无加工机制，常造成N-Met冗余，做为药物，容易引起免疫反应；⑤细菌的内毒素不容易清除；⑥细菌的蛋白酶常常把外源基因的表达产物消化；5、用蓝藻做宿主生产基因工程药物有什么优越

4、性？蓝藻：很有前途的药物基因的宿主细胞①有内源质粒，美国Wolk实验室已构建1200种人工质粒，可用做基因载体。②载体转化蓝藻不需要诱发感受态就可以做到；③外源基因产物不形成包含体，分离与纯化工艺可以大大被简化；④可以直接食用，等于直接口服药物6、结合pBG-2说明选择用于E.coli细胞宿主中的载体的6项原则。P23与pBV220优点类似，原则P227、简述基因工程菌中质粒不稳定的两个指标？P32如何计算质粒的稳定性？P33质粒稳定性分析方法（ST=出现的菌落数/100）8、简述提高质粒稳定性的两步培养法P33分阶段控制培养普遍使用的两步培养法，是在接种后只

5、让菌体细胞快速分裂，这一步培养过程中，外源基因不表达；然后再诱导载体上的药物基因以最高效率表达，积累药物蛋白。9、简述基因工程药物分离纯化工艺设计中必须考虑的药物的5个特点。P46（↓摘自PPT）⑴在初始物料中的含量低：药物分离困难。外源基因表达尽管是在菌体生长对数期被诱导的，在与菌体生长过程中的代谢产物比较，在发酵产物的初始物料中含量也是很低的。⑵初始物料的成分复杂：不利于药物蛋白的分离与纯化。除了药物基因产物外，菌体细胞、代谢产物、残留的培养基、无机盐，尤其是药物蛋白的类似物。⑶药物蛋白的稳定性差：分离与纯化条件相对苛刻。容易失活或变性，对各种物理化学因素

6、十分敏感。⑷分离与纯化的技术差异大：基因工程药物种类繁多、结构复杂。不同的药物分离与纯化必须考虑其分子特征。⑸对不同药物的质量和纯度有不同的要求：药品质量标准是根据药物的应用制定的，没有统一的制备、分离、纯化的标准。第三章动物细胞工程制药1、解释动物细胞的两种培养方式。动物细胞培养大致可分为两种：群体培养(massculture)是把一定数量的细胞悬浮液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合(confluence)后形成单细胞层。克隆培养(clonalculture)是将高度稀释的游离细胞悬浮液置于培养瓶中，各个细胞贴壁后彼此距离较远，经过生长增殖，每一个细胞集落

7、均来源于一个细胞祖先，称为一个“克隆”(“clone”)。2、举例说明三种细胞培养特征。P801、贴壁细胞：生长须有贴附的支持物表面；贴附因子来自培养基或细胞自身分泌。有两种细胞类型：成纤维细胞型、上皮细胞型。2、悬浮细胞：生长不依赖支持物表面，在培养液中悬浮生长，如淋巴细胞。3、兼性贴壁细胞：生长对贴壁支持物表面要求不严格。如中国地鼠卵巢细胞（CHO），小鼠L929细胞。3、细胞系与细胞株的区别是什么？细胞系(cellline)：从原代培养经传代培养后得到的一群不均一的细胞，可以连续培养，即这些细胞具备培养条件下的无限增殖能力。细胞株(cellstrain)

8、：通过选择或克隆化，从原代培养的细胞群