用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察.doc

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2、(4以上,精神沉郁、厌食、呼吸困难,耳朵、乳头、外阴、腹部、尾部发纟甘,以耳尖最为常见。怀孕母猪流产或早产,论文联盟.Corri产木乃伊、死胎和病弱仔猪,死产率可达80%-100%o仔猪特别是乳仔猪死亡率很高,可达80%以上。大多数新生仔猪出现呼吸困难(腹式肌肉震颤、后躯麻痹、共济失调、打喷嚏、嗜睡、精神沉郁、食欲不振等症状。育肥猪体温可升高至419左右,食欲明显减少或废绝,多数全身发红,呼吸加快,咳嗽明显,个别病猪流少量黏性鼻液[1]□该病大多混合感染猪瘟(HCVX猪流感病毒(SIVX伪狂犬病

3、病毒(ADVX猪圆环病毒2型(PCV・II)和猪胸膜肺炎(APP'猪链球菌、副猪嗜血杆菌(HPX多杀性巴氏杆£3®(PMX猪支原体肺炎(MH'弓形体、附红细胞体、猪霍乱沙门氏菌(SC)等,无继发感染的病猪死亡率较低。2010年5月以来,在宜昌市先后对8起普通型猪蓝耳病疫情进行了治疗,共治疗1496头,治愈1319头,取得了很好的效果。现将治疗情况总结如下。1材料与方法1・1蓝耳病的诊断2010年5月以来,先后对宜昌市出现有猪蓝耳病临床症状的8例病猪血样进行了PCR诊断。111试验材料猪全血:疑似

4、症状猪全血共24份(每例3份b引物:参照方六荣[2K李彬等[3]的方法设计一对特异性引物。上游引物(Nsp2F)序列为5-TGGGCGACAATGTCCC・3,下游引物(Nsp2R)序列为5-GCTGAGTATTTTGGGCG-3OPRRSV变异株和经典毒株预期扩增产物长度分别为448bp和508bp。主要试剂:RNA提取试剂盒购自美国OMEGA公司;RT-PCR试剂盒购自大连宝生物公司;低分子量蛋白质Marker、琼脂糖购自0X0ID公司。1.1.2试验方法病毒总RNA的提取:采集的全血分离后

5、收集上清,RNA病毒的抽提按试剂盒说明书进行。反转录反应:按TaKaRaRNAPCRKit(AMV)Ver3・0说明书进行。反转录产物直接用于PCR反应模板或・20°C保存。PCR反应:反转录产物10L,5PCRBuffer10.0L,上下游引物各0.5L(20mol/L),TTaqHS0.25L(5U/L),用灭双蒸水补充总体积至50LoPCR反应条件为:949变性5min;进入PCR循环,9491min,57°C1min,72°C1min,35次循环后,729延伸10min,49保存。PCR

6、产物电泳检测:PCR产物在1%琼脂糖凝胶上进行电泳,当漠酚蓝电泳至适当位置,在长波紫外灯/凝胶成像系统下观察或拍照。1・2分组治疗1・2.1疫苗猪蓝耳病弱毒疫苗为武汉中博生物股份有限公司生产的高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1・R株'1.2.2治疗方法对确认发生普通型猪蓝耳病的猪每头论文联盟管理加强饲养环境管理,降低饲养密度,加强通风、防暑降温,改善猪舍环境。调整日粮,对病猪饲喂高能量饲料及青绿饲料,提高饲料中维生素及矿物质含量。1・3・4加强对其他病的诊治蓝耳疫情中常混有猪瘟等其他疫病

7、,因此必须加强对其他疫病的免疫工作,减少混合感染,减少死亡。2结果与分析2.1PCR反应结果提取总RNA、RT-PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳,阳性对照变异毒株获得大小为418bp左右的片段,经典毒株获得大小为508bp左右的片段,与预期片段大小一致。发病猪血样片段都在500bp以上。初步诊断发病病例为普通型猪蓝耳病。2.2分组治疗结果治疗10d后,病猪情况基本稳定。统计结果见表1o由表1可见,利用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗30kg以上的发生普通型猪蓝耳病的病猪,治愈率可达90・2%。对30kg以

8、下的猪,治愈率低于50%,建议不用此法。3小结与讨论利用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗30kg以上的发生普通型猪蓝耳病的病猪,取得了很好的效果,治愈率达90.2%。猪蓝耳病疫苗的最大优点就是对猪蓝耳病野毒有干扰作用,注射后几个小时就会诱导机体产生干扰素(IFN),尤其是大剂量注射猪蓝耳病疫苗的时候产生得更快。干扰野毒病毒的复制,机体本身产生的干扰素是源源不断的,而且是越来越多,4d达到高峰,可维持十几天之久。大剂量的猪蓝耳病疫苗能迅速导致IFN的产生和释放,同时被病毒感染的细胞死亡、崩解,IFN也随之释放

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