实验一中药显微鉴定技术.doc

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1、实验二中药显微鉴定技术（二）【目的要求】1.掌握常用细胞壁显微鉴定技术2.掌握常用细胞内含物显微鉴定方法3.练习显微观察方法【仪器、试剂、材料】1.仪器生物显微镜，目镜测微尺，镜台测微尺，显微描绘器，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，酒精灯，单面刀片，粉碎机，绘图板，铅笔等。2.试剂水合氯醛试剂，苏丹Ⅲ试液，稀甘油试剂，盐酸，硝酸，碘化铋钾试剂，氯化锌碘试液，硫酸，α-萘酚浓硫酸试液，碘试液，间苯三酚试液，钌红试液，硝酸汞试液，乙醚，石油醚，90%乙醇，70%乙醇，α-萘酚乙醇溶液，稀盐酸，稀醋酸等。3.药材样品牛膝、薄荷、石斛、4.药

2、材粉末大黄、肉桂、山药、黄芪、金银花、红花、洋金花、半夏、桔梗、木香、穿心莲【实验内容】一、用于组织切片及粉末药材的封藏剂1．水合氯醛试液为常用优良的化学透明剂之一，特点是能迅速透入组织，使干燥收缩的细胞逐渐膨胀复原，并能溶解大多数细胞内含物，如淀粉粒、叶绿体、菊糖、树脂、蛋白质、挥发油等，使细胞组织清晰透明，易于观察。用水合氯醛装片可观察各种组织特征，各种结晶，如草酸钙结晶、碳酸钙结晶和硅质块，各类细胞形状，如导管、纤维、石细胞、木栓细胞等。不加热装片可观察菊糖、橙皮苷结晶等。天冷时，水合氯醛装片后易析出结晶，可加一滴稀甘油避免。

3、2．稀甘油为物理性透明剂，能较快的透入组织，形成良好的透光条件，一般作临时封藏剂，常用于观察胡粉粒和菌丝等。3．甘油醋酸（斯氏液）用于观察淀粉粒或测量其大小的封藏剂。也可以用乳酸酚溶液代替。4．乙醇根据不同目的，选用不同浓度的乙醇装片。50％以上浓度的乙醇可以固定乳管；80～90％浓度的乙醇可以固定和观察菊糖；95％的乙醇可以观察黏液细胞；100%乙醇可用于植物叶绿体脱色；低浓度（10～30％）乙醇可以代替水软化含黏液质的材料。5．蒸馏水可以溶解水溶性物质，透入组织较快，但不能溶解大多数细胞内含物，透明度差，易干燥。可用于检查淀粉粒

4、的有无或配合其他试剂检查细胞壁和细胞内含物的性质。二、用于检查细胞壁和细胞内含物性质的试剂1.间苯三酚试液常与浓盐酸配用，检查木化细胞壁。加间苯三酚试液1～2滴，稍放置，再加浓盐酸1滴，木化细胞壁因木化程度不同，显淡红色、红色或紫红色。2．氯化锌碘试液检查纤维素细胞壁。加氯化锌碘试液或先加碘试液后，稍放置，用滤纸条吸去多余的碘液，再加66％硫酸溶液，纤维素细胞壁显蓝色或紫色。3．苏丹Ⅲ试液检查角质化或栓质化细胞壁，以及脂肪油、挥发油和树脂等细胞内含物。加苏丹Ⅲ试液，放置15min以上，或微加热，角质化、栓化细胞壁显桔红色至红色；脂肪

5、油、挥发油和树脂显桔红色、红色或紫红色。4．碘试液检查淀粉粒和糊粉粒。加碘试液，淀粉粒显蓝色或蓝紫色；糊粉粒显棕色或黄棕色，后者加硝酸汞试液，显砖红色。5．α－萘酚试液常与浓硫酸配用，检查菊糖等。6/66．钌红试液检查黏液质。加钌红试液，黏液质显红色。也可用95％乙醇装片，观察黏液细胞形状后，自玻片的一边引入1滴蒸馏水，可见黏液细胞逐渐膨胀，黏液质溶解而扩散。7．稀醋酸草酸钙结晶加稀醋酸后不溶解。8．稀盐酸加稀盐酸，草酸钙结晶和碳酸钙结晶均溶解，而碳酸钙结晶溶解并产生气泡。9．稀（20％）硫酸加20％硫酸，草酸钙结晶和碳酸钙结晶均溶

6、解，并可产生硫酸钙针晶，而碳酸钙结晶溶解并产生气泡。硅质块在各种稀酸中均不溶解。三、试验观察1.淀粉粒取半夏粉末水装片，观察淀粉粒的类型、形状，观察脐点的形状、位置，层纹的有无。用碘试液检验。2.石细胞取黄柏粉末少许，制水合氯醛加热透化片，观察并描述石细胞的形状、颜色，观察细胞壁及孔沟的特征。用间苯三酚-浓盐酸制片，观察和描述石细胞壁的木化情况。3.纤维取肉桂粉末少许，制水合氯醛透化片，观察并描述韧皮纤维的分布状态、形状、颜色、细胞壁的特征，测量细胞的长度和直径。用间苯三酚-浓盐酸制片，观察和描述细胞壁的木化情况。4.木栓细胞取黄芪

7、粉末少许，制水合氯醛透化片，观察并描述木栓细胞的存在状态、切面观和表面观的形状、颜色。用间苯三酚-浓盐酸试液制片，观察和描述木栓细胞的木化情况；用苏丹Ⅲ试液制片，观察和描述木栓细胞的木栓化情况。5.草酸钙针晶取山药粉末少许，制水合氯醛加热透化片，观察并描述草酸钙晶体的类型、存在状态。6.碳酸钙晶体（钟乳体）取穿心莲粉末少许，制水合氯醛加热透化片，观察并描述碳酸钙晶体的分布状态、形状、颜色。在制片边缘滴加少许盐酸，观察钟乳体的变化和产生的现象。7.草酸钙晶体取大黄粉末少许，制水合氯醛加热透化片，观察并描述草酸钙晶体的形态、大小、颜色。

8、加20％硫酸检查。8.硅质块晶体取石斛粉末或药材纵切，制水合氯醛加热透化。观察并描述硅质块形状、大小、颜色。加稀酸检查。9.菊糖取木香或桔梗粉末少许，用水或水合氯醛制片（不透化），观察并描述菊糖的分布状态、形状、颜色，表面特征。加α－