培养观察细菌的简易方法.doc

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1、培养观察细菌的简易方法一、牙垢中的细菌用消毒牙签，在自己牙齿缝里挑下一些碎屑，放在洁净载玻片上的水滴中，调匀，制成涂片。待涂片干燥后，在酒耕灯火焰上徐徐來冋掠过3〜4次,细菌外面的一些胶质粘着在载玻片上，使细菌固定、稍冷,加一滴亚甲基蓝溶液，染色1〜2分钟后,用清水冲洗，然后盖上盖玻片。置显微镜下，先用低倍镜观察，再换髙倍镜，可观察到杆菌、弧菌、球菌等。若使用油镜观察，效果更清楚明显。二、粪池里的细菌在粪池用吸管吸取一滴涙过的粪混合液上层液体，滴在洁净的载玻片上，盖上盖玻片。置显微镜下观察，先用低倍镜，后用

2、高倍镜。可见到活的螺旋菌及杆菌。注意在观察时光线应暗些，效果好。三、酸莱、酸奶中的细菌取酸菜液上部的臼色薄膜或酸奶澄清液，制成临时装片，放在高倍镜下观察，可看到乳酸杆菌。四、根瘤菌的观察取豆科植物［大豆、蚕豆、花生］的根瘤用刀片切开，用针挑取一小块内容物，放在载玻片上的水滴中,制成涂片，晾干后，用酒粘灯火焰烘烤固定，然后滴一滴亚甲基蓝溶液，染色2〜3分钟，清水冲洗，盖上盖玻片，吸干后，用500倍高倍镜观察，可见到短杆状根瘤菌。五、枯草杆菌的培养和观察把25克新鲜干草切成小段，放在盛200毫升清水烧杯中，加热

3、煮沸15分钟，待溶液呈暗褐色时，倒入烧瓶，放在黑暗、20〜30°C的温暖环境中。2〜3天后，液体混浊，表面形成薄膜。用吸管吸取浮在上层的液体，制成临时涂片，放在高倍镜下观察，可看到连成线的枯草杆菌。若将培养液放在低温处1〜2天，再取出制成临时涂片，用600倍或更高倍数的显微镜观察还能看到枯草杆菌的芽抱。微生物学实验细菌细胞的生化反应实验一、实验目的了解并掌握细菌鉴定屮常用生理生化反应的原理和方法。二、实验原理各种细菌山于具有不同的酹系统，致使它们能利用不同的底物，或虽然可以利用相同的底物，却产生不同的代谢产

4、物，因此可以利用各种生理生化反应來鉴别细菌。糖发酵是最常用的生化反应，存在于大多数细菌中。不同的细菌在糖的分解能力上存在很大的差异。有些细菌能分解某种糖并产生酸性物质（如乳酸、丙酸、醋酸等）和气体（如二氧化碳、氢、甲烷等），而有些细菌只产生酸不产生气体。例如大肠杆菌分解乳糖和葡萄糖产酸并产气，普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气但不能分解乳糖。酸的产生可利用指示剂來判断。在培养基中加入漠甲酚紫SII5.2为黄色，PII6.8为紫色），当发酵产酸时，使培养基山紫色变为黄色。气体的产生可山发酵试管中倒置的徳汉氏小管中

5、有无气泡的出现來验证.三、试剂与器材1•材料大肠杆菌、普通变性杆菌、产气杆菌、糖发酵培养基、蛋白腺水培养基、葡萄糖蛋白腺水培养基。2.试剂甲基红试剂、40%K0H、5%a—蔡酚、乙瞇、U引喙试剂。3.实验器材徳汉氏小管、试管、接种坏、恒温培养箱。四、实验内容培养基配制->编号―试管->接种T培养->观察结果五、关键步骤及注意事项1.要严格按照培养基配方配制培养基。2.观察结果时要注意滴加药最及反应时间。六、思考题1•哪些生理生化试验可用于区别大肠杆菌和产生肠杆菌?结果如何？2.做糖发酵试验时应注意哪些问题？

6、3.甲基红试验和伏一普试验的最终产物如何？为什么会出现不同的最终产物?微生物学实验微生物直接计数法及测微技术一、实验目的1.了解血球计数板计数原理，并学握计数方法。2.掌握用测微尺测定微生物大小的方法。二、实验原理显微镜直接计数法是将一定稀释的菌体或砲子悬液注入血球计数板的计数室屮，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。因为计数板是一块特别的载玻片。其上山四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，一种是一个大方格分成25个中

7、方格，而毎个中方格又分成16个小方格（见图2—3—44）:另一种是一个大方格分成16个屮方格，毎个屮方格又分成25个小方格，无论哪种毎个大方格屮的小方格都是400个。毎一个大方格边长为0.1mm,所以计数室的容积为0.11D1D3.计数时,通常只用5个中格内的菌体（他子）数即可。然后求出毎个中方格的平均值，再乘上25或16,得出一个大方格中的总茵数，再换算成51菌液中的总菌数。若设5个屮方格中总菌数为N,菌液稀释倍数为如果是25个屮方格计数板，则计算方法为：lml菌液中的总菌数二平均毎个中格中菌的个数x25

8、x10"xM=50000N-M（个）微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具——测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。镜台测微尺是屮央部分刻有将确等分线的载玻片,一般是将lmm等分为100格，毎格长0.01mm（即10pm）。镜台测微尺并不直接用來测最细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺毎格的相对长度。三、试剂与器材1.材料酿酒酵母、藤黄微