医学微生物-—实验三.ppt

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1、医学微生物学实验三微生物的代谢产物及致病作用分解代谢产物—生化反应糖发酵试验H2S产生试验接种生化管、结果示教靛基质试验合成代谢产物内毒素的致病作用:2只家兔/班细菌溶血、产色素现象---示教细菌的分解代谢细菌的生化反应：原理：不同细菌具有不同的酶，对营养物质的分解能力亦不同，因而代谢产物有别。通过检测细菌的代谢作用和代谢产物，借以鉴别细菌种类的生化方法。常见的生化反应：1、对糖的分解代谢：糖发酵试验、甲基红试验、VP试验2、对蛋白质的分解代谢：靛基质试验、H2S试验3、其他：尿素酶试验、枸橼酸盐利用试验糖发酵试验乳糖乳糖渗透酶葡萄糖酸

2、类物质半乳糖苷酶肠道致病菌多数不分解乳糖，如伤寒沙门菌、痢疾志贺菌。肠道非致病菌可分解多种糖类，如大肠埃希菌有助于鉴别肠道杆菌培养基：葡萄糖、乳糖培养基指示剂为溴甲酚紫结果：产酸：分解糖(苷/醇)产酸，培养基变黄色“＋”产酸产气：培养基变黄且出现气泡或裂隙“＋”不分解：“－”-+-+靛基质（吲哚，Indol）试验原理：细菌分解培养基中的色氨酸→靛基质（吲哚）→加入对二甲基氨基苯甲醛→玫瑰吲哚（红色）培养基：蛋白胨培养基结果：上层玫瑰红色“+”硫化氢试验原理：细菌分解含硫氨基酸(胱aa、半胱aa)生成H2S，遇Pb2+或Fe2+形成黑色P

3、bS或FeS沉淀培养基：硫化氢培养基结果：培养基变黑“+”+-IMViC试验大肠埃希菌++--产气肠杆菌--++细菌的合成代谢产物热原质、毒素与侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素1、溶血素有的细菌能产生溶血素，使血平板中的红细胞溶解，在菌落周围出现溶血环。观察：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌在血平板上的溶血环水溶性：色素可扩散至培养基中如：铜绿假单胞菌的色素脂溶性：色素只局限在菌落，大多数细菌。如：金黄色葡萄球菌的色素2、细菌菌落的色素铜绿各种不同色素一、操作1.糖发酵试验：葡萄糖、乳糖（各1支/人）接种菌种：大肠或沙门菌2.靛基质试

4、验：蛋白胨（1支/人）接种菌种：大肠或沙门菌3.硫化氢试验：硫化氢（1支/人）接种菌种：大肠或沙门菌4.细菌的鞭毛变异现象观察接种变形杆菌至SS平板和普通琼脂平板（点种）5.平板划线：血平板（接种金葡或铜绿）1个/人，普平（接种金葡或铜绿）1个/人二、示教1.菌落色素、溶血现象观察：金葡、铜绿在血平板2.葡萄糖、乳糖、硫化氢试验的结果观察（各1支/大组）3.靛基质试验：加入靛基质试剂后观察结果（已加试剂）（1支/大组）实验内容