临床微生物—肠杆菌科概述、大肠埃希菌.ppt

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1、第八章肠杆菌科（Enterobacteriaceae）1广州医科大学临床微生物检验教研室寇晓霞第一节概述1.肠杆菌科细菌共性2.肠杆菌科细菌鉴定原则3.肠杆菌科临床意义2掌握熟悉1.肠杆菌科细菌的分类一、分类抗原分析生化反应核酸杂交序列分析33个菌属120多个菌种自然界分布广泛、种类众多大多数为肠道正常菌群易培养、繁殖快临床常见的有15个菌属埃希菌属志贺菌属沙门菌属耶尔森菌属克雷伯菌属枸橼酸杆菌属肠杆菌属沙雷菌属变形杆菌属泛菌属普罗威登菌属摩根菌属哈夫尼亚菌属邻单胞菌属爱德华菌属少数为致病菌，部分为条件致病菌约40种以上可以在临

2、床标本中检出5常居菌埃希菌属变形杆菌属肠杆菌属枸橼酸杆菌属克雷伯菌属普罗威登菌属摩根菌属、泛菌属沙雷菌属等条件致病菌(一般不致病)致病菌沙门氏菌属志贺氏菌属某些埃希菌耶尔森菌属（肠内和肠外感染）6肠杆菌科中与临床有关的常见菌属埃希菌属大肠杆菌沙门菌属伤寒沙门菌志贺菌属痢疾志贺菌枸橼酸菌属弗劳地枸橼酸菌克雷伯菌属肺炎克雷伯菌肠杆菌属产气肠杆菌泛菌属成团泛菌哈夫尼菌属蜂房哈夫尼菌沙雷菌属粘质沙雷菌变形杆菌属奇异变形杆菌摩根菌属摩氏摩根菌普罗威登斯菌属斯氏普罗威登斯菌耶尔森菌属鼠疫耶尔森菌菌属（genus）代表种（species）二、

3、临床意义1.菌毛或菌毛样结构2.荚膜或微荚膜3.内毒素4.外毒素（肠毒素）7致病物质1.肠道内感染急、慢性肠道感染、腹泻、食物中毒等2.肠道外感染鼠疫（烈性传染病），泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系统感染，菌血症8二、临床意义所致疾病9肠杆菌科细菌引起不同部位感染中枢神经系统（埃希菌属）血液（埃希菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属）胃肠道（某些埃希菌、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属）泌尿道（埃希菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属、摩根菌属）下呼吸道（克雷伯菌属、肠杆菌属、埃希菌属）三、生物学特性1.形态染色结构革兰阴性杆菌或球杆状多数有鞭毛多

4、数有菌毛无芽孢10鞭毛共同特性11变形杆菌阴沟杆肠菌小肠耶尔森菌伤寒沙门菌福氏志贺菌大肠埃希菌生物学性状近似的一大群革兰阴性杆菌2.生长条件需氧或兼性厌氧营养要求不高（中等大小、灰白或淡黄色、湿润、光滑菌落）12变形杆菌菌落特征（Mac）伤寒沙门菌菌落特征（血平板）大肠埃希菌菌落特征（普通平板）三、生物学特性共同特性3.生化反应发酵葡萄糖氧化酶阴性触酶阳性硝酸盐还原阳性13葡萄糖发酵（＋）触酶试验（＋）氧化酶试验（－）硝酸盐还原试验（＋）三、生物学特性共同特性14鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原三、生物学特性抗原结构O

5、抗原和H抗原：是肠杆菌科血清分群和分型的依据表面抗原（K、Vi抗原）：可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热（100℃，15--30min)处理可消除。15抗原结构16耐低温，不耐热（60℃，30min，杀死）水中生存期较长，不耐干燥化学消毒剂敏感耐胆盐和抵抗某些染料的作用（伊红、美兰等）三、生物学特性抵抗力17溶源性转换生化反应性变异通过引起耐药性变异毒力性变异转化、转导接合三、生物学特性变异18①肠外标本:采自不同的感染部位如血液、体液、呼吸道、伤口、尿液及其他各种标本。②肠道标本:疾病早期留取新鲜粪便，挑取粘液脓血部分进行

6、培养。应在2h内进行，以利志贺菌等检出。如不能及时培养应冷藏待检。样本采集四、微生物学检验肠杆菌科细菌鉴定步骤科的鉴定：革兰阴性杆菌，氧化酶阴性属、种的鉴定：各种生化反应特征血清学试验19鉴定到属种201.粪便标本：形态及染色性多无鉴别意义2.其他标本：革兰阴性杆菌标本直接检查211.肠道外标本：1）正常无菌标本（血、脑脊液等）先肉汤增菌后再转种血平板和Mac平板。2）痰、分泌物等标本：接种血、巧克力平板和Mac。2.肠道标本：1）肛拭：GN肉汤增菌后转种至肠道选择性培养基2）粪便：直接接种肠道选择性培养基。3）如疑耶尔森菌感染

7、可用耶尔森菌选择琼脂(CIN)。分离培养成分和作用：基础培养基：提供氮源和碳源胆盐、枸橼酸钠、煌绿：可抑制肠道非致病菌和革兰阳性球菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖、中性红（pH6.8-8.0，红→橙黄）：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色；大肠杆菌等肠道非致病菌分解乳糖产酸，菌落呈红色铁离子：与硫化氢生成硫化亚铁黑色沉淀。22SS平板（Salmonella-Shigella）分离肠道病原菌的强选择培养基肠道病原菌:小,无色或淡黄色,半透明或不透明菌落肠道非致病菌:大,红色菌落23SS平板（Salmon

8、ella-Shigella）分离肠道病原菌的强选择培养基24SS平板（空白）大肠杆菌伤寒杆菌25肠道病原菌:半透明或不透明,无色或灰白、淡黄色小菌落肠道非致病菌:红色（Mac）、紫黑色(EMB)、蓝色(中国蓝）混浊较大菌落。成分：与SS类似，但不含铁离子，抑制剂