钩状木霉生物还原制备纳米银的研究.pdf

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3、名：张杰副教授东北林业大学申请学位级别；硕ｉ学科专业；微生物学论文提交日期：２０巧年５月论文答辩日期；２０１５年６月授予学位单位；东北林业大学授予学位日期；２０１５年６月答辩委员会主席：论文评阅人：、杂苗１＃４乂學ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｄｅ：１０２２５ＲｅｉｓｔｅｒＣｏｄｅ：Ｓ１５４２５ｇＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｂｉｏｓｎｔｈｅｓｉｓｓｉｌｖｅｒｎａｎｏａｒｔｉｃｌｅｓｕｓｉｎｙｐｇＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｍａｔｕｍ

4、Ｃａｎｄｉｄａｔｅ：ＺｈａｎｇＹｉｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：ＺｈａｎＪｉｅｐｇ乂ｓｓｏｃｉａ化Ｓｕｅｒｖｉｓｏｒ：ｐＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅＡｌｉｅｄｆｏｒ：ＭａｓｔｅｒｇｐｐＳｅｃｉａｌｉｔ：ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｐｙｇｙＤａｔｅｏｆＯｒａｌＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊｕｎｅ．２０１５Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ：ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｙ＾摘要＋本实验采用在±壤悬液中添加Ａｇ的方法在东北林业大学帽儿山林场王壤中筛选出能合成纳米银的真菌菌株，通过形态学特征观察及分子生物学

5、方法对菌株进行鉴定；－，采用ＵＶｖｉｓ，ＴＥＭ、ＸＲＤ及ＦＴＩＲ等手段对纳米银进行表征利用真菌合成纳米银；大肠杆菌和枯草芽袍杆菌为受试菌株－，对纳米银的杀菌性能进行初步测定利用ＳＤＳ；ＰＡＧＥ电泳技术分析真菌胞外滤液的蛋白变化及纳米银表面附着蛋白，对纳米银的合成机理进行初步探讨。（１）合成纳米银真菌的筛选及鉴定＋采用在±壤悬液中添加Ａｇ的方法筛选出能合成纳米银的真菌ＮＹＺＪ０３并对其进行鉴定。ＰＤＡ固体培养基上的ＮＹＺＪ０３菌丝为白色，基质为黄色；菌落生长较缓慢，表面光滑，气生菌丝较少；菌丝具有明显的分枝，较为密集，间隔明显且很有规律

6、，大约为５ｎｍ左右；不能明显的看到细胞核。ＮＹＺＪ０３特异性打Ｓ基因序列长度为５７７ｂｐ，在ＧｅｎＢａｎｋ中的ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ．是ＫＭ０５４５３２；系统发育树显示菌株ＮＹＺＪ０３与钩状木霉一个族群形成，同源性达９９．５％Ｗ上。根据菌株的菌落特征、菌丝形态和ＩＴＳ基因序列’分析，巧步将该菌鉴定为钩状木霉（趴ｃＡｏ旅ｎｒｎｚＡａｗａ化Ｗ）。ＮＹＺＪ０３保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中也（ＣＧＭＣＣ），保藏编号为ＣＧＭＣＣＮｏ．９３３３。（２）纳米银的合成及表征Ａ－ｖ采用菌体与ｇＮ〇３混合培养的方法合成纳米银并利用紫

7、外全波长扫描（ＵＶｉｓ）、Ｘ射线衍射分析（ＸＲＤ）、透射电子显微镜（ＴＥＭ）、能量色谱分析（ＥＤＳ）及傅里叶变换红外分析（ＦＴＩＲ）等手段对纳米银进行表征；热重分析法和原子光谱吸收法分别对纳米＋银的产率和Ａｇ转化率进行测定和计算。结果显示纳米银纳为面也立方结构，结晶程度较好且很纯净，；纳米银具有单分散性，无团聚现象，多数为近球形绝大多数小于９ｎｍ均为６．６９ｎｍＦＴＩＲ结果表明纳米银可能被蛋白或多肤等生物大分子包裹，平；；热重＋分析结果显示纳米银的产率为６７．１２％，而原子光谱吸收的结果显示Ａｇ的转化率为８４．４１％。（３）纳