拟南芥（Arabidopsis thaliana L.）谷氨酰胺合成酶GS1.2和GS1.4基因功能的比较研究.pdf

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1、校代；ｊｒ品７学佐冷文’拟南芥Ｃ４ｍ６ｆＶ／巧；ｓ／ｓ＾／ｉａ／＃ｆｌ／ｉａｉ．）爸氨醜胺合成酶ＧＷ．２和ＧＳ／．４基因功能的比较研究许琳＇．－．；＾Ｐ乡＾■ｆ指导１Ｃｔ．ＢＳ胃５［师姓５Ａ名＾媛媛獅东北林业大学１申请学位级别：硕±学科专业：生物化学与分子生物学论文提交曰期：２０巧年４月论文答辩曰期；２０巧年６月授子学位单位；东北林业大学授予学位日期：２０巧年６月答辩委员会主席：论文评阅人：如抑若义聲，来学校代码；１０２２５学号；Ｓ１５５９７学化文欺南芥扣谷氨煎胺合成酶ＧＳ７．２和基因功能的比较研究

2、许琳乡奎教Ｓ东北林＾大学指导教师姓名■ｈ醒獅东北林业大学申请学位级别：硕±学科专业：生物化学与分子生物学论文提交日期：２０巧年４月论文答辩日期；２０巧年６月授予学位单位：东北林业大学授予学位日期：２０巧年６月答辩委员会主席、：论文评阅人：Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｄｅ：１０２２５ＣＲｅｇｉｓｔｅｒＣｏｄｅ：Ｓ１５巧７Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ化ｒ化ｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣｏｍａｒａｔｉｖｅｔｈｅＦｕｎｃｔｉｏ打ｏｆ幻ｐＧｌｕｔａｍｉｎｅＳｙｎｔｈｅｔａｓｅＧＳ１．２ａｎｄＧＳ１．４Ｃａｎｄｉ

3、ｄａｔｅ：ＸｕＬｉｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＬｉｕＳｈｅｎｋｕｉＡ＾ｓｓｏｃｉａ化Ｓｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＳＥＢｕＹｕａｎｙｕａｎＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅ乂ｌｉｅｄｆｏｒ：ＭａｓｔｅｒｇｐｐＳｅｃｉａｌｉｔ：ｐｙＤａｔｅｏｆＯｒａｌＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊｕｎｅ２０１５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ＾摘要ｎ一谷氨醜胺合成酶（ＧｌｕｔａｍｉｎｅｓｙｔｈｅｔａｓｅＧＳＯ是参与第步将氨催化同化成有机氮，的关键酶，推测植物中的ＧＳ能够通过同化较离子，从

4、而缓解盐胁迫导致的氨毒害作用，因此本论文｛＾模式植物拽南芥（心伽成取￥１？掀渝３？０）的６８基因作为研巧对象，对说／．入基因在表达特性、对盐胁迫的响应进行分化试图揭示ＧＳ／．２、城在拟南芥受盐逆境胁迫时起到的抗逆作用。首先，通过半定量和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的手段／．２，对ＧＳ和的表达进行比较分。析①对野生型巧南芥植株的研巧结果表明．２Ｓ７．４，ＧＳＪ和Ｇ在干种子中都不表达，ＧＷ．２在苗期表达量大于萌发时期表达量，而在萌发期的表达量大于苗期表达量．２Ｓ７，ＧＷ主要在根和花中大量表达，Ｇ．４主要在根和成熟叶片中表这；②不同非生物环境胁迫下的分析结果显示，Ｇ

5、Ｓ７．２和在种子萌发期和幼苗期对盐胁迫都存在应答关系，均呈上调表法，推测说７．２和ＧＳ７．４为盐逆境胁迫相关基因，两周苗期，ＣｄＣｂ胁迫处理时，说７．２和均呈明显的上调表达；③不同氮源处理条件下的分ＫＮ０．７Ｎ＆Ｃｌ处析结果显示，３和尿素作为氮源时，ＧＳＪ２和ＧＳ．４也表现为上调表达，理时，城７．２表现为下调表达，而ＧＳ７．４无明显应答。综上所述，饼７．２和说７．４具有显著的时空表达特异性，这两个基因的表达都和环境胁迫，氮素条件相关，但是表达的一定的区别模式有。其次，通过花序侵染法构建了巧南芥说７．２和ＧＳ７．￥基因的过表达植株，筛选繁殖获得了３代纯合株系，

6、并通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｏ扣ｈｅｍｂｌｏｔ的方法进行鉴定，各获得兰个独立株系。野生型和说７．２和过表法植株在盐胁迫处理下的研究结果显示，ＧＳ／．２和说７．４过表达植株的长势均优于野生型，且盐胁迫处理下过表达植株根长略长于野生型，ＧＳ／．２和的过量表达均使种子在盐胁迫下的萌发率有所提高，因此推断ＧＳ７．２和ＧＳ７．４基因的过量表达可提高拟南芥植株对盐逆境胁迫的耐受性。综上所述，ＧＳ／２和具有显著的时空表达恃异性，且对不同非生物环境胁迫和氮源有响应，ＧＳＺ２和ＧＳ７．４基因的过量表达可Ｗ提高抵南芥植株对盐逆境胁迫的抗性。关键词谷氨醜胺合成酶；盐胁迫

7、；拟南芥；氨同化；种子萌发－－ＩＡｂｓｔｒａｃｔＡｂｓｔｒａｃｔＧ山化ｍｉｎｅｓｙｉｉｔｈｅ１；ａｓｅＧＳａｋｅｅ打ｓｍｅｏｆａｍｍｏｎｉｕｍａｓｓｉｒｒｄｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｉｓａｅｒｕｓｅｄｔｈｅ（）ｙｙｐｐｍｏｄｅａｎｔ／ｏｔｔｔｔｅｎｅａｓｔｅｃｔｏｆｓｔｕｔｅｌｐｌ？７２幻／口打幻ｆｈｅｌｕａｍｉｎｅｓｎｈｅａｓｅｈｅｏｂｄｈｇｙｇｊｙ，Ｇ５