Id1基因表达与垂体腺瘤的侵袭性研究.pdf

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1、分类号：单位代码：安工夂论文题目：基因表达与垂体腺瘤的侵袭性研究作者姓名马勃专业名称免疫学导师姓名李志强教授完成时间：二—五年六月中图分类号：论文编号：学科分类号：密级：—公一安徽理工大学硕士学位论文基因表达与垂体腺瘤的侵袭性研宂作者姓名：马勃专业名称：免疫学研究方向：神经免疫和颅脑创伤导师姓名：李志强教授导师单位：安徽理工大学答辩委员会主席：杨立新论文答辩日期：年月曰安徽理工大学研究生处年月日ADissertationinImmunologyStudyoftheexpressionofIdlgenetoinvasionofthepituitaryade

2、nomaCandidate:MaBoSupervisor:LiZhiqiangMedicalSchoolAnHuiUniversityofScienceandTechnologyNo.168，独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方以外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽理工大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：另基曰期少年月曰学位论文版

3、权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽理工大学有保留、使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属于安徽理工大学。学校有权保留并向囯家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽理工大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名签字曰期力年彡月日导师签名签字日期年月日摘要摘要【目的】初步研宄蛋白在侵袭性垂体腺瘤组织中的表达及意义，构建代号为的原代侵袭性垂体腺瘤细胞株，探讨转染后细胞侵

4、袭性的改变，从而为临床诊断和治疗侵袭性垂体腺瘤提供新的理论和实验依据。【方法】分别检测蛋白在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达我们从本院收集的例术中新鲜冰冻垂体腺瘤中随机选取例侵袭性垂体瘤和例非侵袭性垂体瘤提取全蛋白，提取的总蛋白，加入蛋白上样缓冲液按比例，于°煮沸。方法检测后观察凝胶图像，应用图像软件扫描凝胶图片，得到相应灰度值，分析蛋白在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达是否有显著差异。构建代号为的原代侵袭性垂体腺瘤细胞株术中取出垂体腺瘤组织后，在无菌条件下放入溶液中，封口膜封口，置于冰桶中转移至实验室。通过机械消化和酶消化结合方法分离细胞。本课题组利用

5、侵性垂体腺瘤新鲜组织样本原代培养成代号为的细胞。转染细胞用无酶稀释成，分装储存于°。转染时用细胞培养液稀释，按照比例和混匀，室温静置，然后按照不同终浓度加入不含血清的培养液中，继续培养后换成含血清的培养液继续培养。检测转染后细胞中的蛋白表达，检验基因沉默效率。移行小室侵袭实验检测转染细胞后对其侵袭能力的影响，倍光镜下随机取个视野计数膜背面的穿膜细胞，取平均数。实验重复次。【结果】基因在侵袭性垂体瘤中的表达明显高于在非侵袭性垂体瘤中的表达，差异有统计学意义（，，，，也同样进一步提示基因在侵袭性垂体瘤中具有调节作用。蛋白在转染后的细胞中表达显著减低。摘要在倍

6、随机选取的个视野下计数对照组与干扰组细胞数发现被转染的细胞组为（±，未被转染的细胞组为土，差异有统计学意义，。表明转染靶向干扰后，细胞的迁移能力明显降低。蛋白在转染后的细胞中表达显著减低。【结论】蛋白在侵袭性垂体腺瘤中表达上调，与非侵袭性垂体腺瘤相比具有显著性差异，有统计学意义。蛋白可促进垂体腺瘤细胞的侵袭、迁移等生物学行为，基因靶向治疗可能成为治疗侵袭性垂体腺瘤的新的策略之一。图表参关键词：基因；垂体腺瘤；侵袭性分类号：Abstract【】【】，°，。摘要，，±土，：目录目录插图或附表清单注释说明清单弓丨第一部分在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤中的表

7、达弓言材料与方法结果舰第二部分蛋白在垂体腺瘤细胞的表达与其侵袭性的相关性研宄弓胃材料与方法練讨论参考文献波‘后记或致谢作者简介及读研期间主要成果目录插图或附附表清单插图或附表清单表对细胞侵袭能力的影响（±图在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达图和分别在被干扰后的细胞和未被干扰的细胞（对照组）中的表达图未转染细胞图转染的细胞插图或附附表清单注释说明清单缩写英文全称中文名称分化抑制因子螺旋环螺旋结构小干扰干扰血管内皮生长因子牛血清白蛋白缓冲液磷酸盐缓冲液二甲基亚砜社会科学统计包十二烷基磺酸钠甲基乙二胺增强化学发光法垂体肿瘤转化基因人单丝氨酸蛋白激酶引言弓丨言侵

8、袭性垂体腺瘤，类似于恶性肿瘤，具有向周围组织呈侵袭性生长的生物学特性，常常侵犯鞍