课题2　月季的花药培养 (3).ppt

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1、单倍体育种花粉粒（1N）单倍体植株（1N）二倍体纯合子植株（2N）优点：明显缩短育种年限。花药离体培养人工诱导染色体数加倍月季的花药培养一、基础知识（一）被子植物的花粉发育小孢子四分体时期单核期双核期小孢子四分体时期、单核期、双核期等阶段。减数分裂2nnnnnn有丝分裂花粉母细胞花粉粒1花粉母细胞（2n）4个小孢子(小孢子_______时期)（n）减数分裂有丝分裂1个_______细胞核（n）1个_______细胞核（n）____个精子单核____期（n）单核___期（n）1个_____细胞（n）4个花粉粒（n）每个花粉粒（n）分离1个_____细

2、胞（n）双核期四分体居中靠边花粉管生殖生殖营养有丝分裂2小组讨论总结：花粉发育过程图解移栽（二）产生花粉植株的两种途径提示：分化与再分化：1.胚状体培养为丛芽叫分化，不叫再分化，因为不符合再分化的定义。2.愈伤组织培养为丛芽叫再分化，符合定义。①②花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根胚状体定义：某些细胞在形态上转变为与合子（受精卵）发育成的胚非常相似的结构，发育过程也与合子胚类似，胚芽、胚轴、胚根等结构完整。类型：1.体细胞胚：就像一颗种子，可用于生产人工种子。2.花粉胚：可发育成单倍体植株。这两种途径之间没

3、有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及浓度配比。1、材料的选择(三)、影响花药培养的主要因素从花期看：从花粉看：从花蕾看：月季的初花期（五月初到五月中旬）单核期（一般来说，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高）完全未开放的花蕾——主要是材料的选择与培养基的组成不同植物的诱导成功率很不相同.思考：1、单核期以前或以后的花药为什么不行？2、为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？同一植物亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接的影响.2、培养基的组成（配方）（MS培养基+不同比例的激素或植物生长调节剂）3、其他因素：亲本植株的生长条件、

4、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功率有一定影响。二、实验操作阅读课本39-40页，讨论回答以下问题1、通过什么确定所选花粉处于适宜的发育期？2、确定花粉发育时期最常用的方法？不宜着色的花粉粒细胞核需采用什么方法？染色结果?3、材料消毒的步骤（5步）4、接种和培养的步骤（5步）及注意事项。实验操作（一）材料选取醋酸洋红法，将染色体染成红色。通过______来确定是否处于适宜的发育期。镜检（对于某些植物的花粉细胞核不易着色使用）最常用方法：焙花青-铬矾法，花粉细胞核染成蓝黑色。（二）材料的消毒5、_________冲洗3～5次花药的外面有花萼、花瓣保

5、护，通常处于无菌状态1、花蕾用____________________浸泡_____秒2、________清洗3、_________吸干花蕾表面的水分4、放入______________________溶液中_____分钟（质量分数为1%的______________或饱和漂白粉溶液）体积分数为70%的酒精30无菌水无菌吸水纸质量分数为0.1%的氯化汞2～4次氯酸钙溶液无菌水（三）接种和培养1、剥取花药温度？光照？2、接种花药3、培养4、转移培养、移植培养5、鉴定和筛选不损伤花药原因？彻底去花丝原因？染色体组的数目变化原因？每个培养瓶接种_____

6、_____个花药主要原因是营养核和生殖核融合造成的。培养基有无区别？7～10二实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养知识小结1.花粉的发育过程：2.产生花粉植株的两种途径：3.影响花药培养的主要因素：——材料的选择与培养基的组成4.实验操作：（2012年山东卷）辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低

7、”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是______________________。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_______。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_________和纤维素酶。脱分化再分化琼脂低高压蒸汽灭菌70%果胶酶菊花的组织培养与月季的花药培养比较相同点1.原理相同，都利用了细胞的全能性2.过程基本相同，都经过了脱分化和再分化3.培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。不同点1.前者培养的是体细胞，属于无性生殖；后者培养的是生殖细胞，属有性生殖。2.取材的时期、要求不同3.

8、培养基的配方略有不同，花药培养对配方要求更严格