实验二：凝胶图像分析.doc

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1、实验二：凝胶图像分析姓名：李婉贞班级：09药学1班【实验目的】本实验的目的是学会使用Gel-ProAnalyzer,进行DNA的定量、定性分析。【实验过程】%1.DNA分析(1)首先打开Gel-Pro程序，选择“DNAanalysis”，点击“OK”打开一张tif格式保存的图片，选择DNA,打开，避免错选图片，可进行预览7x(2)若条带横向不是很水平，竖向不是很垂直，可以用“lD・Gel”工具栏上的“Rotate”进行旋转■RotntcAAlima：d*:th14D.es,

2、pleft「Rotatein件J80d「Kolata90dogclocksKolftte90degcottarc!✓C1o:qInge0KCancel点击"Lanes”进行泳道的选择RotateStMtdwdSlantResultsReportsSave3&doJFindlanevidthauttnatxPrfifbroncoViwzIfnifornLuivYidlbFcrc«ztrAishtl«a

3、-_旦区lD-Ct-l竺IiBUfl■■LaneProfile-DBA.tif(1/1)选好泳道后，进行“Band”选择，点击任意一条泳道，在光密度示图上就会出现该泳道上各个条带的光密度，如下图■1D-CelRotet«LanesBackgroundN.tfStandardSlantRaxultzPreferVievsReportsi_开—jiiF(3)点击“M・WStandard”,进行内标的设置，点击“Reset”,选择分子量标记Marker的泳道。选择泳道后，对该泳道上的各个条带进行分子量标记。点击“New”，在“Name”输入“DL2000”，点击

4、“Add”,依次输入“2000、1000、750、500、200、100”。结果如下，点击"AutoLocate”,各个分子量自动标记到Lanel的对应条带上1001IIIIS4a

5、sgl»■LumfiuliU1‘‘一)ULtH(1/1)・LXlli£<<*UUm1-hK&uffl/l)750（4）对各个泳道上的目的条带进行分子量的确定，点击“Results”,结果如下，黑字表示泳道各个条带的分子量，Gel-Pro定义每条泳道的总DNA含量是100ng,每个条带则依据亮度（光密度值）比例确认各个条带的ng数，也就

6、是下图的蓝字所示:【实验结果】结果，以光密度值I0D表示口回冈Aaounts/lol•■eights-DMA.tif(1/1)FileShowLoadsCalibrat©Updat©Absolut©integraODofeachband・GOD)G.L.*Pix.(Mol.w.bp▽Rel/bands―AmountsRel.ab%GiODiCmax.ODLanes:BandsLane1(mol.w.)(IOD)Lane2(mol.w.)

7、(IOD)Lane3(mol.w.)(IOD)Lane4(mol.w.)(IOD)Lane5(mol.w.)

8、(IOD)

9、

10、120005889029521.03e52952■771382905657402905f7143121000491581952L73424■200053619233315511252416485375038474128665576128650391■92368046I923■70446450032884827598798274072781736597.82741771

11、52002275032538345325■24655

12、67044223682■435846LiooL10412225368112254384020844448217553787319406

13、345624.116922433169「256948148170781492270399311295971501910778538.7771163811317068.734/7641.1121314二、蛋白质电泳图分析与DNA电泳图的分析差别没有太大的不同，只是实验类型选择"Proteinanalysis”。三、杂交带分析(1)实验类型选择“Dotblotanalysis”，打开杂交图像(1)点击“Dlots”，设定7X8的网格，在“Diameter”设置直径为45,将“LookDots”选项设定为空，自行挪动生成的圆圈到杂交点上，点击“OK”，结果如下:

14、JShcvLabels(✓Fill曲皿MoScaleDevaHid