实验三 根茎叶显微观察与徒手切片.doc

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1、实验三根茎叶显微观察与徒手切片一、目的要求1、学习植物的徒手切片技术2、了解植物细胞的多样性，积累植物组织的知识，建立纽•织与功能协调一致的概念。二、基本原理根茎叶是植物的营养器官，都是由各种细胞和组织组成的。通过切片，我们可以在不同的切片屮分别看到保护组织、机械组织、营养组织、输导组织、分生组织等。徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片，制成临时的水装片用于观察的植物组织制片技术Z—。所作的切片通常不经染色或经简单染色，也可以通过脱水与染色制成永久制片。徒手切片的优点是简单、方便，不要复杂的设备，不经化学药物的处理，基木上保留了植物活体的

2、状态。其操作要点是：在培养1111中放入清水。用左手大拇指、食指、屮指等拿住材料，拇指略低于食指，且拇指要伸岚呈反弯状态，屮指等在下部稳定材料。材料切面要高于拘指，但略低于食指，双面刀片放在食指上，只有给它略加一个向下的力时，刀刃才能接触到材料。右手用食指和大拇指捏住双面刀片的一角，留出所有的刀刃部分，使刀刃近手指的一端首选接触到材料，然后让刀刃在材料上斜切下去,如果把材料切面看作是一个长方形的活，那么刀刃在材料上拉的是长方形的一条对角线，即从左前方向右后方拉切，注意不是垂直切向材料，一片，一片…，轻松、快速地切，估计有满意的了，再一起放入盛有清

3、水的培养川1•屮，挑选最薄的一片，装片观察。不要试图每一片都很薄，也不要追求切片形状的完整。其次，一定要注意，切片时不论是站着还是坐着，都要挺胸、放松地进行，是整个手臂在用力，也就是你在切片时，是肩关节在动，而不是肘关节，更不是腕关节。另外，切片时水是润滑剂，你的手指上、材料上、刀片上随时都应该有水。三、实验材料.试剂与仪器设备生物显微镜、载玻片、盖玻片、双面刀片、培养1111、滴管、吸水纸、毛笔，根茎叶结构的相关切片、莺尾Iristectorum的根、某种合适的双了叶植物的根、蚕豆Viciafaba的茎、蚕豆的叶、南瓜Cucurbitamosc

4、hata茎、大叶黄杨Euonymusjaponicus的嫩茎、芹菜Apiumgraveoiens的叶柄、海桐Pittos-porumtobira或大叶黄杨的叶、小麦Triticumaestivum或其他禾本科小草的叶、萝卜的肉质直根,清水、I2-KI水溶液、0.1%番红染液四、实验步骤（一）根的显微结构1、根尖的内部结构取玉米或洋葱根尖纵切永久制片，置于显微镜下，市根的最先端逐渐向上观察根尖的各区，注意各区细胞的特点。%1根冠在根尖的最先端，由薄壁细胞组成，像一个套在分生区前面的帽了，在根冠的外侧，可见到某些正在脱落的细胞。%1分生区根冠Z内，紧

5、接根冠的一段区域。由排列紧密的等径细胞组成，其细胞壁薄、核大、细胞质浓悖。细胞分裂能力强，常可以见到正在有丝分裂的细胞。%1伸长区位于分生区的上方，从靠近分生区略微伸长的细胞到接近成熟区的长形细胞,细胞逐渐伸长并液泡化，向成熟区过渡。伸长区的细胞仍具有分裂的能力，边分裂，边分化,可以见到正在分裂的细胞，并有了初步的组织分化。在伸长区如何区分原表皮、基木分生组织和原形成层?在制片上常可见到宽大的成串长细胞，想想这些细胞将来分化成根的什么结构？%1成熟区（根毛区）位于伸长区上方，表面密生根毛的区域。在根毛区细胞分裂停止,分化成各种成熟组织时，可见到成

6、熟的环纹、螺纹导管。注意根毛的起源以及结构特点。2、单子叶植物根的结构取徳尾根2-5cm进行徒手横切（此根有一定的硬度，且较细，横切瓯一般低于1伽2,不适于初学切片，可以在芹菜叶柄和蚕豆茎切片Z后再切此片），并制成临时装片，不染色或用0.1%番红染色后在显微镜下观察，由外向内分为表皮、皮层和维管柱三部分：%1表皮根的最外层细胞，排列粥齐，有根毛。%1皮层外皮层细胞1-2层，细胞小，排列整齐。在较老的根屮，外皮层细胞壁增厚，木质化或栓质化。内皮层细胞幼时与一般双了叶植物结构走不多，有凯氏带加厚。随着发冇的进行，内皮层细胞出现五瓯加厚，并栓质化，仅外

7、切向面为薄的，在横切面上呈马蹄形。注意内皮层通道细胞的位置。%1维管柱由屮柱鞘、初生木质部和初生韧皮部组成。屮柱鞘为紧贴内皮层的一层薄壁细胞。初生木质部和初生韧皮部相间排列，木质部脊数目较多，为多原型。维管柱中央是薄壁细胞组成的髓。3、双子叶植物根的结构⑴取蚕豆或向口葵幼根永久制片，也可以取其幼根的成熟区做徒手切片，置于显微镜下,由外向内观察双了叶植物根的初生结构O%1表皮幼根的最外层细胞，是径向扁平、排列整齐的一层细胞，外壁具有角质膜，有些细胞向外突起形成根毛。%1皮层表皮Z内的多层薄壁细胞。紧接表皮之下的是一层排列紧‘密的薄壁细胞叫外皮层，皮

8、层的最内层细胞称为内皮层，也是一层排列紧密的细胞。在其径向壁和上、下壁上常有局部木质或栓质的加厚，彼此联结成环带状，这就是凯氏带。由于在