花粉生命力的测定与形态观察.doc

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1、实验三花粉生命力的测定与形态观察花期不遇，给杂交工作造成困难,有的树木和园林植物nJ通过催延花期解决,有的则不得不进行花粉贮藏，为此我们必须掌握花粉贮藏的原理与技术。为了避免杂交工作失误，在使用远地寄来的花粉或经过-•段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉生命力进行鉴定，以便对杂交成果进行分析与研究。一、实验目的掌握了解花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法及原理。二、实验材料芙蓉花的花粉。三、仪器及药品载玻片、盖玻片、标签、标记笔、显微镜、蔗糖、蒸锚水、联苯胺、-蔡酚、酒精、碳酸钠、过氧化氢、琼脂。四、实验原理在园艺植物有性杂交工作屮，常因杂交亲本间花期不遇，或父本植株栽

2、在异处（地）而必须预先收集花粉。花粉贮藏在低温（0〜4°C）、干燥（相对湿度0〜40%）、黑暗的环境下，代谢降低，可以较长时间地保持花粉生活力，但其贮藏期长短对花粉生活力的影响因詁利硕不同。在授粉之前，对贮藏的或外地采來的花粉必须预先测定花粉的生活力，以确定哪些花粉不能用于杂交，这对取得杂交效果有直接影响。一是将待测花粉直接授粉，然后统计结实率和结子数。此法的缺点是需时间较长，且实验结果易受气候条件的影响；二是将待测粉受到柱头上，隔一定时间切下柱头，在显微镜下检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低來鉴定花粉的生命力；三是在培养基上进行花粉的人工萌发，检查待测花粉

3、萌发率的高低。将花粉播种在特定的培养基上，并在一定的坏境条件下来测定其发芽能力的方法。培养基常用蔗糖、琼脂（1%）和蒸镭水配制而成。不同植物的花粉，对蔗糖浓度要求不同，如柑桔花粉要求25%左右，苹果和梨10〜15%,桃10%左右为宜。蔗糖浓度高低可调节培养基的渗透压，以防止花粉在培养基上破裂。培养基以微酸性为宜，一般在pH5.2〜6之间。发芽温度在20〜25°C左右，并需要空气和湿度，为了促进花粉发芽，在培养基屮还可加入少量的硼酸和维生素Bk利用花粉发芽试验测定花粉生活力是一种直接的测定方法，其结果也最可靠，但操作较麻烦，要有一定设备和一定时间。四是用染色方法

4、来鉴定花粉的生命力。其原理是在活的花粉内有过氧化氢酶实验三花粉生命力的测定与形态观察花期不遇，给杂交工作造成困难,有的树木和园林植物nJ通过催延花期解决,有的则不得不进行花粉贮藏，为此我们必须掌握花粉贮藏的原理与技术。为了避免杂交工作失误，在使用远地寄来的花粉或经过-•段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉生命力进行鉴定，以便对杂交成果进行分析与研究。一、实验目的掌握了解花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法及原理。二、实验材料芙蓉花的花粉。三、仪器及药品载玻片、盖玻片、标签、标记笔、显微镜、蔗糖、蒸锚水、联苯胺、-蔡酚、酒精、碳酸钠、过氧化氢、琼脂。四、实验原理在园艺植物

5、有性杂交工作屮，常因杂交亲本间花期不遇，或父本植株栽在异处（地）而必须预先收集花粉。花粉贮藏在低温（0〜4°C）、干燥（相对湿度0〜40%）、黑暗的环境下，代谢降低，可以较长时间地保持花粉生活力，但其贮藏期长短对花粉生活力的影响因詁利硕不同。在授粉之前，对贮藏的或外地采來的花粉必须预先测定花粉的生活力，以确定哪些花粉不能用于杂交，这对取得杂交效果有直接影响。一是将待测花粉直接授粉，然后统计结实率和结子数。此法的缺点是需时间较长，且实验结果易受气候条件的影响；二是将待测粉受到柱头上，隔一定时间切下柱头，在显微镜下检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低來鉴定花粉的生

6、命力；三是在培养基上进行花粉的人工萌发，检查待测花粉萌发率的高低。将花粉播种在特定的培养基上，并在一定的坏境条件下来测定其发芽能力的方法。培养基常用蔗糖、琼脂（1%）和蒸镭水配制而成。不同植物的花粉，对蔗糖浓度要求不同，如柑桔花粉要求25%左右，苹果和梨10〜15%,桃10%左右为宜。蔗糖浓度高低可调节培养基的渗透压，以防止花粉在培养基上破裂。培养基以微酸性为宜，一般在pH5.2〜6之间。发芽温度在20〜25°C左右，并需要空气和湿度，为了促进花粉发芽，在培养基屮还可加入少量的硼酸和维生素Bk利用花粉发芽试验测定花粉生活力是一种直接的测定方法，其结果也最可靠，

7、但操作较麻烦，要有一定设备和一定时间。四是用染色方法来鉴定花粉的生命力。其原理是在活的花粉内有过氧化氢酶存在。它可以促进过氧化物（如H0）放氧分解。这些刚被放出的活性氧很容易使还原剂氧化。在本实验中所用的无色联苯胺a•荼酚都是还原剂，但他们被氧化后却都表现红色或玫瑰红色。如果花粉是活的，那么这个反应很快，则花粉被染成红色或玫瑰红色；如果花粉是死的，则这一反映迟迟不能进行，花粉也就保持原色。此色优点是比较快捷，但比较间接。利用化学药剂染色的方法测定花粉生活力，这是一种间接的测定方法，简便而快速，但比较粗略，有吋不能真实反映出有发芽力花粉的数量。五、实验步骤1、花

8、粉发芽试验（1）培养基的配制:在100