【人教版】生物选修一：2.3《分解纤维素的微生物的分离》ppt同步课件.ppt

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1、课题3　分解纤维素的微生物的分离课程标准1.研究培养基对微生物的选择作用。2.探讨微生物的利用。课标解读1.简述纤维素酶的组成及作用。2.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。纤维素分解菌的筛选复合C1酶Cx酶葡萄糖苷酶C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶2．纤维素分解菌的筛选(1)筛选方法：法。(2)筛选原理：刚果红可以与纤维素形成，当纤维素被分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现，我们可以通过来筛选纤维素分解菌。刚果红染色红色复合物纤维素酶以纤维素分解菌为中心的透明圈是否产生透明圈[思维激活1]纤维

2、素分解菌的选择培养基中“选择因子”是什么？提示纤维素分解菌中唯一的碳源是“纤维素粉”，唯有能利用纤维素的微生物方可在该培养基上生存，其他微生物将因缺乏碳源而无法生存，以此，可筛选到纤维素分解菌。1．纤维素分解菌的筛选原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2．筛选过程中涉及的两种培养基(1)纤维素分解菌的选择培养基①配方：组分含量/g提供的主要营养纤维素粉5碳源、能源NaNO31无机盐Na2HPO4·7H2O1.2KH2PO40.9MgSO4·7H2O0.5KCl0.5酵母膏0.5生长因子、碳源、氮源水解酪

3、素0.5氮源、生长因子将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。(2)鉴别纤维素分解菌的培养基①配方：组分含量提供的主要营养CMC－Na5～10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐琼脂15g凝固剂土豆汁100mL碳源将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL②此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。【巩固1】分析下面培养基的配方，请回答下面的问题。纤维素分

4、解菌的选择培养基：纤维素粉　　　　　　5gNaNO31gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。(1)此培养基配方中为微生物提供碳源和氮源的分别是______、______。(2)此配方为______培养基(根据物理状态)。(3)此培养基选择出的微生物主要是_________________________。解析该培养基的唯一碳源是纤维素粉，氮源有NaNO3、酵母膏。因没有凝固剂成分，因

5、此，该培养基从物理状态上看属于液体培养基。因该培养基仅以纤维素粉为唯一碳源，因此，可用于选择培养纤维素分解菌。答案(1)纤维素粉　NaNO3、酵母膏　(2)液体　(3)纤维素分解菌1．分离纤维素分解菌的实验设计(1)实验流程：土壤取样→(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别的培养基上→挑选产生的菌落。(2)土壤取样采集土样时，可以选择的环境。分离土壤中纤维素分解菌实验操作选择培养纤维素分解菌透明圈纤维素丰富(3)选择培养①目的：增加纤维素分解菌的，确保能够从样品中分离到所需要的。②选择培养：称取土样20g，在无

6、菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养1～2d，直至培养液变。也可重复选择培养。浓度微生物摇床混浊③挑选菌落a．刚果红染色法，挑选的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先，再加入进行反应，另一种是在时就加入刚果红。产生透明圈培养微生物刚果红颜色倒平板2．课题延伸(1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行的实验，纤维素酶的发酵方法有和两种。(2)纤维素酶的测定方法一般采用。发酵产纤维素酶液体发酵固体发酵对纤维素酶分解滤纸等纤维素

7、后所产生的葡萄糖进行定量测定[思维激活2]由“选择培养”实验操作过程请你推测纤维素分解菌的异化类型是需氧型还是厌氧型？提示由选择培养操作中“将锥形瓶置于摇床上”可推测纤维素分解菌的异化类型为需氧型。1．土壤中纤维素分解菌的分离流程2．两种刚果红染色法比较优点显示出颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂①由于琼脂、土豆汁中均含有淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应；②有些微生物具有降解色素的能力，它们会降解刚果红形成透明圈，

8、与纤维素分解菌不易区分特别提醒(1)本实验方案中应设置普通培养基(或牛肉膏蛋白胨培养基)作为对照实验。(2)分离纤维素分解菌先经选择培养，其目的是增加纤维素分解菌的浓度；然后经梯度稀释后，再涂布到鉴别培养基上。【巩固2】下列关于分离纤维素分解菌实验的叙述，错误的是(　　)。A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．选择培养这一步可省略，但培养