Apelin基因的表达规律及其在脂肪代谢中的调控作用.pdf

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5、于动物产品质量的提高，还可以为肥胖、糖尿病、高血压等多种疾病提供一定的理论依据，为该类药物的开发提供新思路。脂肪组织不仅可以储存能量，而且可以分泌Apelin、瘦素（Leptin）、抵抗素(Resistin)等脂肪因子。它们通过自分泌、旁分泌的方式调控脂肪代谢和脂肪细胞的分化，参与肥胖及相关疾病的病理过程，因此对这些脂肪因子的研究显得尤为重要。Apelin在2005年被确定为脂肪因子，它是G蛋白偶联的受体血管紧张素Ⅱ受体样蛋白-J（APJ）的天然配体，在鼠类和人类的皮下脂肪组织中发现了Apelin的mRNA和蛋白质的表达。进一步研究发现A

6、pelin可增加整体能量的消耗，提高胰岛素的敏感性从而抑制胰岛素抵抗的发生，与肥胖引起的多种疾病有重要关联。虽然目前Apelin基因已经在一些动物中被克隆，但在猪这种重要的模式生物中尚未见该基因克隆及功能验证的报道。小檗碱（Berberine）又名黄连素，研究表明小檗碱通过AMPK信号通路改善小鼠糖脂代谢状况，从而降低肥胖小鼠体重。PPARγ和C/EBPα是成熟脂肪细胞形成过程中的[1,2]关键基因，小檗碱可以降低这些关键基因的表达量，从而抑制脂肪细胞的分化。但目前关于小檗碱对Apelin基因表达的影响未见报道。本试验首先以猪的脂肪组织为

7、研究材料，克隆Apelin基因片段；运用半定量RT-PCR技术探究Apelin基因在猪的7个不同组织间的表达规律，同时比较物种间Apelin基因的表达变化，研究种属间的表达差异；使用不同浓度的小檗碱处理健康SD大白鼠，取其皮下和肾脏周围的脂肪组织，采用反转录PCR和蛋白质印迹技术检测小檗碱对Apelin、PPARγ、LPL、LXRα等基因表达的影响，探讨小檗碱在机体内发挥降脂的分子作用机制；最后对Apelin基因进行生物信息学分析，并建立生物进化I山西师范大学学位论文树对其亲缘关系进行预测，进一步研究Apelin基因的生物学功能，并为小檗

8、碱在体脂沉积方面的应用提供理论依据。研究结果如下：1、猪Apelin基因的克隆。以猪的脂肪组织总RNA反转录的cDNA第一链为模板，采用逆转录PCR等技术克隆出猪的Apelin基因片段，片段长