[精品]生理实验 小肠平滑肌生理特性的观察与分析.doc

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1、消化道平滑肌生理特性及药物影响一、实验目的：1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。2、观察消化道平滑肌H律性运动及药物温度的影响。二、实验原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比Z下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩，对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体示，置于适宜的溶液屮，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。三、实验材料——1、实验动物：家兔2、器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器（量程为2

2、5g以下）、BL410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养川I.、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、lmol/LNaOH溶液、lmol/LHCl溶液、2%CaC12溶液。四、实验方法和步骤1、标木制备流程:%1击昏家兔:川木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。%1剖开腹腔快速取岀肠管：立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20〜30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液屮轻轻漂洗，把肠内容物基木洗净。%1制作离体肠标

3、木：将肠管分成数段，每段长2-3cm,两端备系一条线，保存于供氧的3X°C左右的台氏液屮2、仪器安装与调试实验安装（如图）：恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38°CO将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。仪器调试：BL-410系统的使用，选择“实验项目"屮的“消化实验”选屮“消化道平滑肌生理特性S相关参数设置的参考值：时间常数—DC,高频滤波F->30Hz,显速->4.00s/div,增益->100go用

4、鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩曲线稳定后,单击记录按钮。五、1/10万Ach2滴tI1/万Adr2滴tI1/万Atr2滴tI2min后加Ach2滴tI换25度台氏液继之一42度42度->六、1.待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照Illi线。2.乙酰胆碱的作用用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1〜2滴。观察到明显效应后，立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆•碱，使Z达到无效浓度，待小肠运动恢

5、复后进行下一项。3•肾上腺素的作用按上述方法将0.01%肾上腺素加入浴槽内1〜2滴，观察小肠运动的反应。当效果明显后，立即更换台氏液。4.氯化钙的作用加2%CaC12溶液2〜3滴入灌流浴槽内，观察其反应，效果明显后迅速冲洗。5.盐酸的作用力口1〜2滴1mol/LHCl溶液入浴槽内，观察其反应。6.氢氧化钠的作用在（5）基础上加等容量的Imol/LNaOH溶液入浴槽内，观察其反应。按上述方法更换台氏液，反复冲洗。7.温度的影响将浴槽内台氏液放出，注入25°C台氏液，观察平滑肌收缩有何改变，当效应明显后再换

6、入38°C台氏液，持续一段时间后，再换入42°C台氏液，观察收缩活动的变化（亦可根据室温的具体情况选做其屮的一项）。七、注意事项——1.实验过程屮必须保证标木的供氧（通气）及浴槽内台氏液的恒温（38°C）,以维持标木活性。2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。3.放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。4.上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加。5.每次实验效果明显示立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌出现不可逆反应。6.各项处理必须有处理标记。八、相关知识家兔小肠平滑肌以胃幽

7、门与十二指肠交界处的肠管活动最好，对生物化学因素也较敏感，所以选取用此处肠管作标木。九、作业1.从记录曲线屮观察比较小肠平滑肌与心肌、骨骼肌的收缩特性有何不同?说明其原理。2.通过观察分析记录曲线变化，阐明各项处理引起的收缩频率、收缩强度和张力变化的机理。3.结合木章的实验内容，谈谈观察与思维在实验研究屮作用与体会。十、实验讨论：1、正常情况下，我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液屮可以自动地、缓慢地收缩，但具节律性很不规则。小肠平滑肌自律性产生的离了基础尚未完全清楚，目前认为，它的产生可能与细胞膜上生电性

8、钠泵的活动具有波动性有关，当钠泵的活动無时受抑制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时，膜的极化加强，膜电位便又冋到原来的水平。2、在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱（Ach）2滴（约0.2ml）后,可见离体肠管活动增强，描记曲线岀现收缩频率变快，幅度增加。出现上述现彖的机理，H前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离了基础是Ca2+的内流有关。乙酰月FI.碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异