2018版高中生物 第2章 细胞工程 2.2 动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术学案 新人教版选修3.doc

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1、2．2.1　动物细胞培养和核移植技术1．简述动物的细胞培养及条件。(重点)2．举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。3．简述动物核移植的过程及意义。(重、难点)　　动物细胞培养(一)动物细胞工程1．常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。2．基础：动物细胞培养技术。(二)动物细胞培养1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2．过程取动物组织块　分散组织细胞：剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间　制成细胞悬液　原代培养：具有贴壁生长和接触抑制的特点　

2、传代培养3．相关概念(1)细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。(2)细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。(3)原代培养：指动物组织消化后的初次培养。(4)传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现接触抑制后，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖的培养过程。94．培养条件(2)营养(3)温度和pH(4)气体环境5．应用连线表示动物细胞培养的应用及实例①生产生物制品　　　　　a．筛选抗癌药物②用于基因工程b．干扰素、单克隆抗体③检测有毒物质c．培养受体细胞d．判断物质毒性提示：①—b　②—c　③—d　

3、④—a探讨：为什么切取动物组织块进行细胞培养时，常选择胚胎或幼龄动物的器官或组织？提示：因为这些细胞增殖能力强，分化程度低，更容易培养。探讨：在进行动物细胞培养过程中，为什么需用胰蛋白酶处理动物组织？提示：因组织中细胞间基质成分为蛋白质，利用胰蛋白酶可以分解细胞间的蛋白质。探讨：探究动物细胞培养时，为什么要在培养基中加入血清、血浆等天然成分？提示：因血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。因此细胞培养时，为保证细胞能顺利生长和繁殖，一般需添加血清、血浆等天然成分。探讨：动物细胞培养需要控制的气体环境是怎么样

4、的？各自起什么作用？提示：95%的空气和5%的CO2混合气体；O2维持细胞代谢，CO2维持培养液的pH。1．动物细胞培养的操作流程2．过程解读9(1)动物细胞培养需要满足的条件①充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。②适宜的温度：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜。③适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。④气体环境(2)原理：细胞增殖。(3)要把动物细胞分散成单个细胞培养的原因分散成单个细胞后容易培养，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难，

5、因此，这些细胞在体外长时间的生存和生长就较困难。同时，分散成单个细胞培养，可使得在细胞水平操作的其他技术得以实现。(4)选取幼龄动物的组织、器官作为材料的原因动物细胞培养时，一般选取幼龄动物的组织、器官，其细胞的分化程度较低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。(5)原代培养和传代培养的辨析原代培养传代培养可有两种表述：a.细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养；b.第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区别。同样有两种表述：a.细胞悬液培养一段时间后，分瓶再进行的细胞培养；b.传10代以后的细胞培养，统称

6、为传代培养。(6)细胞贴壁(贴壁生长)和接触抑制①细胞贴壁：培养液中分散的动物细胞，置于适宜的条件下，能够分裂，这些细胞贴附在培养瓶壁上，称为细胞贴壁，或贴壁生长。②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。(7)胰蛋白酶在培养过程中的作用及与原代培养和传代培养的联系原代培养和传代培养一般均需对细胞进行胰蛋白酶细胞分散处理，区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。①第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养，即为原代培养。②第二次：细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离

7、下来，然后，将其分散到多个培养瓶中继续培养，即为传代培养。91．一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件(　　)【导学号：72240023】①无毒的环境　②无菌的环境　③合成培养基需加血浆　④温度与动物体温相近　⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2调节培养液pHA．①②③④⑤⑥　　　　　B．①②③④C．①③④⑤⑥D．①②③④⑥【解析】　动物细胞体外培养要求环境无菌、无毒，培养液中添加一定量的抗生素，合成培养基中需加血清、血浆等一些天然成分，适宜的温度、pH分别为36.5±0.5℃、7.2～7.4。O2是细胞代谢所必需的，CO2可维持培养液的pH。【答案】　

8、D2．某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性