PP1γ基因DNA甲基化在学习记忆中的作用.pdf

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1、2017年4月中国实验动物学报April2017第25卷第2期ACTALABOＲATOＲIUMANIMALISSCIENTIASINICAVol．25No．2殝檵檵檵檵殝檵檵殝研究报告檵檵檵檵殝PP1γ基因DNA甲基化在学习记忆中的作用1，2#1，2#1，21，21，2侯林，许晟迪，张柱霞，田小莉，姜树原，1，21，21，2*1，2，3*刘友，巴德仁贵，黄丽华，邵国(1．包头医学院中心实验室生物医学研究中心，基础学院，包头医学院神经科学研究所，内蒙古包头014010;2．内蒙古自治区低氧转化医学重点实验室，内蒙古包头014010;3．首都医科大学宣武医院低

2、氧适应转化医学北京重点实验室，北京100053)【摘要】目的研究蛋白磷酸酶1γ(proteinserine/threoninephosphatase，PP1γ)和DNA甲基化在学习记忆中的作用。方法通过DNA甲基化转移酶(DNAmethytransferases，DNMTs)抑制剂5-aza-cdＲ处理小鼠，观察小鼠学习记忆情况及其PP1γ表达变化，通过水迷宫测定小鼠的学习记忆能力，Ｒeal-timePCＲ检测小鼠海马区DNMTs和PP1γmＲNA转录水平以及Western-Blot测定PP1γ的蛋白质表达水平。为了进一步探讨5-aza-cdＲ对小鼠学习记

3、忆的影响是否与细胞增殖和凋亡有关，用5-aza-cdＲ处理NG108-15神经细胞，流式细胞仪、xCelligence系统和荧光素酶报告基因分别检测5-aza-cdＲ对细胞增殖、凋亡和PP1γ的转录活性的影响。结果侧脑室注射了5-aza-cdＲ的小鼠空间学习记忆能力增加，同时小鼠海马区的DNMTs和PP1γ的表达降低;10μmol/L5-aza-cdＲ抑制细胞增殖，降低PP1γ的转录活性，但是没有诱导细胞凋亡。结论5-aza-cdＲ对PP1γ的表达抑制与小鼠学习记忆有关。【关键词】蛋白磷酸酶1γ;5-aza-cdＲ;海马;学习记忆【中图分类号】Q95-33

4、【文献标识码】A【文章编号】1005-4847(2017)02-0146-07Doi:10.3969/j．issn．1005－4847.2017.02.006EffectofexpressionofPP1γandDNAmethylationonlearningandmemoryinmice1，2#1，2#1，21，21，2HOULin，XUSheng-di，ZHANGZhu-xia，TIANXiao-li，JIANGShu-yuan，1，21，21，2*1，2，3*LIUYou，BADEＲengui，HUANGLi-hua，SHAOGuo(1．Biomed

5、icineＲesearchCenter，BasicMedicalCollegeandNeuroscienceInstitute，BaotouMedicalCollege，Baotou，InnerMongolia014010，China;2．InnerMongoliaKeyLaboratoryofHypoxicTranslationalMedicine，BaotouMedicalCollege，Baotou，InnerMongolia014010;3．BeijingKeyLaboratoryofHypoxiaAdaptationTranslationalMe

6、dicine，XuanwuHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100053)【Abstract】ObjectivesTostudytheroleofproteinserine/threoninephosphatase1γ(PP1γ)andDNAmethylationinlearningandmemory．MethodsThemiceandcellsweretreatedwith5-aza-cdＲ，aDNAmethyltransferase(DNMT)in-hibitor，andtoobservethechang

7、esofabilityoflearningandmemoryandexpressionlevelsofPP1γinmice．TheabilityoflearningandmemoryinmicewasassessedbyMorrisWatermazetest．ThemＲNAexpressionlevelsofDNMTsandPP1γinthemousehippocampusweredeterminedbyreal-timePCＲandtheproteinlevelofPP1γwasmeasuredbyWesternblot．Tofurtherinvesti

8、gatetheirrole，NG108-15celllinewas