03 细胞凝集反应和血细胞形态观察.doc

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1、山东大学实验报告2018年3月26H姓名：丁志康系年级：2016级组另旅1-1科目：细胞生物学实验题目：细胞凝集反应及血细胞形态观察学号：201600140055—%目的要求1、细胞凝集反应%1了解细胞膜的表面结构。%1掌握凝集素促使细胞凝集的原理。%1学习研究细胞凝集反应的方法。2、血细胞形态观察%1掌握血涂片的制备方法。%1认识红细胞及各种白细胞的典型形态。%1掌握人体血型（AB0型）的检验原理与检验方法，同时了解自己的血型。二、实验原理1、凝集反应：细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则

2、的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。戸前认为，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生，都和细胞表面的分枝状糖分子有关。直接凝集反应:直接凝集反应指颗粒性抗原（细菌、螺旋体和红细胞等）在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现的凝集现象。常用的凝集方法有玻片法和试管法两种。/切裁凝集友应••间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联在与免疫无关的、大小合适的颗粒状载体表而，使之形成致敏颗粒，然后与相应抗体（或抗原）反应，在适宜的电

3、解质存在条件下，出现特异性的凝集现象，称为间接凝集反应。常用的载体颗粒有人0型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等。如载体颗粒是红细胞，称间接血凝试验；若为乳胶颗粒，则称为乳胶凝集试验。2、凝集素：凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖转移结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集

4、素是他们的总称。在细胞表而，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。凝集素引起的血细胞凝集,其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物。人们利用凝集素与不同的糖蛋口特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。另外，凝集素在临床疾病防治、

5、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。而凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。3、土豆块茎凝集素：土豆块茎凝集素是一种能结合儿丁质的富含轻脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50,000,包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素等儿丁质结合蛋白具有同源性。土豆凝集素含有50%（质量分数）的糖组分，其中90%是阿拉伯糖，另有少量半乳糖；最丰富的氨基酸是瓮脯氨酸，其次是半胱氨酸。土豆凝集素在水中主要以单体形式存在，能于细胞膜寡糖链

6、上的N-乙酰葡萄糖胺特异性结合，这是其具有凝集活性的主要原因。4、凝血因子：凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是，在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且堵塞血管上的漏口。这个过程被称为凝血。整个凝血过程大致上可分为两个阶段，凝血酶原的激活及凝胶状纤维蛋白的形成。凝血因子一部分由肝生成。可以为香豆素所抑制。为统一命名，世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号，有凝血因子I,II,HI,IV,V,VD,VUI,IX,X,XI,XII,Xlli等。5、ABO血型：AB0血型是

7、根据红细胞膜上是否存在抗原A与抗原B而将血液分成4种血型。红细胞上仅有抗原A为A型，只有抗原B为B型，若同时存在A和B抗原则为AB型，这两种抗原俱无的为0型。不同血型的人血清中含有不同的抗体，但不含有对抗自身红细胞抗原的抗体。AB0血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择AB0血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。我国各族人民中A型、B型及0型血各占约30%,AB型仅占10%左右。6、血细胞：血细胞是存在于血液中的细胞，能随血液的流动遍及全身。以哺乳动物来说，血球

8、细胞主要含下列三个种类：红勿惣：红细胞也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介。咗乳动物成熟的红细胞是无核的，也没有线粒体，它们通过分解葡萄糖释放能量。在机体中主要起运输氧气和二氧化碳的作用。白细胞:白细胞是一•类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群，根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同，分为中性粒细胞、嗜酸粒细