细胞周期同步化.ppt

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1、细胞周期同步化1.主要内容2.同步化的方法讲解人生工二班0912402045陈春玉内容细胞周期同步化是为了某种目的，使处于细胞周期不同阶段的细胞群体中的所有细胞，处于细胞周期的同一时期的过程。有自然同步化和人工同步化同步化方法1.自然同步化2.人工同步化（1）人工选择同步化（2）人工诱导同步化1.自然同步化自然同步化在自然界中，细胞自然同步化的现象在动、植物及粘菌中都有所发现，它们不受人为条件的干扰，因而有可能在接近自然的条件下进行观察。缺点：自然同步化受到很多条件的限制。（1）.人工选择同步化人工选择同步化：人为的将处于不同细胞周期的细胞分离开，从而获得不同时期细胞群体的

2、方法。人工选择同步化的方法：（1）.有丝分裂选择法密（2）度梯度离心法有丝分裂选择法（反复振摇法）利用有丝分裂细胞变圆隆起，与培养皿的附着性降低的特点。此法的特点是细胞不受药物等的伤害，同步化程度高，放入37℃环境中，收集的细胞即可同步分裂。缺点是分裂细胞一般占1%-2％，分离的细胞数量少。密度梯度离心法根据周期时相不同而细胞大小不同。此法的优点是：简单、成本低。缺点是：同步程度有限，因同一时相的细胞大小并非都一致，而且对大多数种类的细胞不适用。（2）人工诱导同步化2.1S期DNA合成阻断法2.2DNA分裂中期阻断法2.3条件倚赖性突变株2.1S期DNA合成阻断法2.1.1

3、S期DNA合成阻断法：选用DNA合成抑制剂可逆地抑制DNA合成而不影响其他期细胞沿周期运转，最终可将细胞群体阻断在S期。高浓度TdR对S期细胞的毒性较小，阻断效果较好，因此成为较常使用的S期阻断剂2.1.2TDR双阻断法:是最常使用的方法向对数增殖期的培养细胞的培液中加入TdR，使细胞阻于S期和G1-S期交界处。移去TdR，洗涤细胞。当释放时间大于ts时，所有细胞均脱离S期，这时再给予第二次TdR阻断。细胞群体再经过G2+M+G1的时间，则细胞阻断于G1-S交界处的一个狭窄的区段中（tG1+tG2+tm＞ts）。DNA合成阻断法优缺点优点：同步化程度高，适用于任何培养体系，

4、可将几乎所有的细胞同步化。缺点：诱导过程造成细胞非均衡生长(蛋白质、RNA合成并不停止)，细胞体积增大，较正常细胞在周期上有差异，有时出现有丝分裂和染色体的异常。2.2DNA分裂中期阻断法某些药物可抑制微管的聚合，将细胞阻断于有丝分裂中期。非平衡生长问题不十分明显。但长时阻断释放后许多细胞不能恢复正常的细胞周期。中期阻断药物最常用者为秋水仙素或其衍生物秋水仙酰胺。DNA分裂中期阻断法的优缺点优点：操作简便，效率高缺点：这些药物的毒性相对较大，若长时阻断释放后许多细胞不能恢复正常的细胞周期运转。2.3条件倚赖性突变株在细胞周期同步化中应用将以分离的条件突变菌株转移到限定条件下

5、培养，所有细胞便被同步化在细胞周期中某一特定时期谢谢观看