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时间:2020-01-23
《F-7000荧光分光光度计使用操作步骤.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、F-7000荧光分光光度计使用操作步骤1、开机:(1)开启计算机。(2)开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。同时,观察主机正面面板右侧的XeLAMP和RUN指示灯依次亮起来,都显示绿色。2、计算机进入WindowsXP视窗后,打开运行软件(如图1)。(1)双击桌面图标(FLSolution2.1forF-7000)。主机自行初始化,扫描界面自动进入。(2)初始化结束后,须预热15-20分钟,按界面提示选择操作方式。图1FLSolution2.1扫描界面3、测试模式的选择:波长扫描(wavelengthscan)(1)点击扫描界面右侧“Method”。(2)在
2、“General”选项中的“Measurement”选择“wavelengthscan”测量模式,如图2。图2Method--“General”选项的界面(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数,如图3。图3Method---“Instrument”选项设置界面主要参数选项包括:选择扫描模式“ScanMode”:Emission/Excitation/Synchronous(发射光谱、激发光谱和同步荧光)。选择数据模式“DataMode”:Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测量、磷光测量、化学发光)。设定波长扫描范围
3、。扫描荧光激发光谱(Excitation):需设定激发光的起始/终止波长(EXStart/EndWL)和荧光发射波长(EMWL);扫描荧光发射光谱(Emission):需设定发射光的起始/终止波长(EMStart/EndWL)和荧光激发波长(EXWL);扫描同步荧光(Synchronous):需设定激发光的起始/终止波长(EXStart/EndWL)和荧光发射波长(EMWL)。!!Attention:激发光终止与起始波长差不小于10nm。选择扫描速度“ScanSpeed”(通常选240nm/min)。选择激发/发射狭缝(EX/EMSlit)。选择光电倍增管负高压“PMTVoltage”(一
4、般选700V)。选择仪器响应时间“Response”(一般选Auto)。选择光闸控制“□ShutterControl”打√,以使仪器在光谱扫描时自动开启,而其他时间关闭。选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长(通常选0.2nm)及输出数据的起始和终止波长(DataStart/End)。!!Attention:DataStart/End需与“Instrument”选项中设置一致,否则所得到的数据点会逐渐减少,而无法作图。(4)参数设置好后,点击“确定”。4、设置文件存储路径(1)点击扫描界面右侧“Sample”,如图4。图4Sample选项的界面(2)样品命名“Sample
5、name”。(3)选中“□AutoFile”,打√。可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。(4)参数设置好后,点击“OK”。5、扫描测试(1)打开盖子,放入待测样品后,盖上盖子。(请勿用力)。(2)点击扫描界面右侧“Measure”(或快捷键F4),窗口在线出现扫描谱图。6、数据处理(1)选中自动弹出的数据窗口,如图5。(2)选择“Trace”,进行读数并寻峰等操作。(3)上传数据。图5扫描谱图窗口3、关机顺序(逆开机顺序实施操作):(1)关闭运行软件FLSolution2.1forF-7000,弹出窗口,如图6。(2)选中“○Closethelamp,thenclosethemo
6、nitorwindows?”,打“⊙”。(3)点击“Yes”。窗口自动关闭。同时,观察主机正面面板右侧的XeLAMP指示灯暗下来,而RUN指示灯仍显示绿色。图6关闭运行软件(2)约十分钟后,关闭仪器主机电源,即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。(目的是仅让风扇工作,使Xe灯室散热)。(3)关闭计算机。寻找激发波长的方法测试前,激发波长未知,可以按照以下步骤寻找激发波长。1.首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数值,如300nm,设置发射光谱范围,通常起始值大于激发波长,小于激发波长的二倍,得到一个发射光谱,得到一个或几个发射波长的峰值2.重新在激发光谱中设置,输入步骤一中
7、得到的发射波长,设置激发光谱范围,通常起始值大于发射波长的一半,小于发射波长,得到激发波长的峰值3.按照步骤二的过程,将几个发射波长都输入,得到几个激发波长4.重复步骤一的过程,输入步骤二,三中得到的激发波长,观察发射光谱的峰形,确定发射光谱。
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