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时间:2020-02-27
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1、分子生物学习题集(2)为什么λ噬菌体感染产生的溶源菌通常对其他的λ噬菌体的感染有免疫?--答案:251.答:首先感染的λ噬菌体所生成的阻抑蛋白cI会立即与随后感染的噬菌体基因组中的操纵基因结合,阻遏裂解所需的cro和N基因的表达。这样再感染不会产生烈性噬菌体表型。IS元件:()--类型:选择题--选择:(a)全是相同的(b)具有转座酶基因(c)是旁侧重复序列(d)引起宿主DNA整合复制(e)每代每个元件转座1000次--答案:252.b,d;请预测具有下列突变的λ噬菌体感染细菌的表型,并说明原因:(1)产生一个抗蛋白酶的λcⅡ蛋白的突变。(2)具有阻止蛋白结合的ΛOR2的突变。(3)使λ基因失
2、去作用的突变。(4)编码入cI蛋白的基因突变。--类型:简答题--答案:253.答:(1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白的λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)。λ噬菌体感,染过程中,在N蛋白(从PL的左侧表达)使基因表达不在N基因下游终止前,所有的生理功能都是正常的。抗终止导致c又及cro基因下游的表达,从而cⅡ蛋白合成。由于λcⅡ蛋白的突变体具有蛋白酶抗性,它的活性并不依辞于被感染细胞的状态(健康的或病态的),而且cⅡ蛋白并不维持cⅡ蛋白的整合。由此导致的高浓度cⅡ蛋白有助于从PRE和P1启动子的转录,因此cI蛋白(阻抑蛋白)、cro反义RNA、和整合酶(λ噬菌体整合所需)被合成。阻抑蛋白占
3、据0R和OL操纵基因,通过自调节促进自身的合成(从PRM表达),从而防止更多的N蛋白和Cro蛋白的合成。(2)能够阻止蛋白质结合的0R2突变体会导致裂解。0R2搬突变体能够防止Cro蛋白和阻抑蛋白与之结合。cro基因表达不需要诱导物,因此可以高水平表达。Cro蛋白也能与OR3进行非协同结合,由于有这种结合以及阻抑基因表达需要自身产物的自诱导,因此不能形成阻抑蛋白。Cro最终会关闭所有早期基因的表达,并通过诱导从PQ开始的表达从而诱发中期和后期基因的表达。综上所述;Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。(3)失活λN基因的突变令导致灭活和降解。N基因的产物是一个抗终止子,是N和cro基因外的其他基因表达所
4、需的。其结果为大量缺陷的N蛋白和Cro蛋白的合成。因此噬菌体既不能进入溶源状态也不能进入裂解途径,DNA最终被降解。(4)编码cI蛋白的基因发生突变时会导致快速裂解。产生没有功能的阻抑蛋白不能与0R和OL操纵基因结合,由于没有了竞争,Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。组成转座子的旁侧IS元件可以:()--类型:选择题--选择:(a)同向(b)反向(c)两个都有功能(d)两个都没有功能--答案:254.a,b,c;鉴定化合物的致癌性的一个通用实验是爱姆斯试验,通过营养缺陷型菌的回复突变确定其致癌性。用λ噬菌体和E.coli设计一个实验使之能用于致癌物的检测。--类型:简答题--答案:255.答:感染E
5、.coli之后,λ噬菌体通常会进入溶源状态。与操纵基因区域结合的λ阻抑蛋白(cI)通过自调节使噬菌体保持溶源状态。致癌复合物极有可能是诱变剂,既可能是通过在cI基因产生一个无义突变或错义突变影响阻抑蛋白的表达,又可能是通过在操纵基因序列中产生一个突变使阻抑蛋白与PRM/PR启动子的操纵基因(0R1和OR2)结合。通过简易的噬菌斑分析,发现噬菌斑的出现与待测化学物质的诱变性与致癌性有关。复制转座:():--类型:选择题--选择:(a)复制转座子,即在老位点上留有一个拷贝(b)移动元件转到一个新的位点,在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列
6、不发生改变--答案:256.a,c,d;为什么像流感病毒这样的RNA病毒的生命周期,有力地支持了以下这一论点:与其说病毒是生命有机体,不如说它是“寄生的遗传因子”--类型:简答题--答案:257.答:RNA病毒的复制依赖于缺失校正活性的RNA复制酶的作用,这样有利于遗传突变。而且,许多RNA病毒的基因组含有多个线性片段。如果两种不同的病毒存在于同一宿主细胞中时,重组会有助于遗传突变。因此RNA病毒的复制不是维持一个“有机物种”的蓝图,而是维持依赖于宿主细胞机制产生后代的遗传因子的感染性。非复制转座:()--类型:选择题--选择:(a)复制转座子,即在原位点上留有一个拷贝(b)移动元件到一个新的
7、位点,在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列不发生改变--答案:258.b,c,e;一个转座子的准确切离:()--类型:选择题--选择:(a)切除转座子和两个靶序列(b)恢复靶DNA到它插入前的序列(c)比不准确切离更经常发生--答案:259.b;大肠杆菌噬菌体T2的染色体是一个线性DNA分子,它的两端都有冗余并且可作循环变换。解释冗余的含
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