分光光度法补充1.ppt

《分光光度法补充1.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、Lamber-beer定律分光光度法计算及应用如何测定溶液中离子的浓度配制一系列浓度已知的标准溶液并显色后，得到浓度与吸光度的关系曲线－－工作曲线。待测溶液的吸光度得到后，在工作曲线上求得浓度的数值。空白12341透射光与吸收光可见光区，不同波长的光呈现不同的颜色。透射光和吸收光可组成白光透射光刺激人眼而使人感觉到颜色的存在吸收光＋透射光＝白光黄色蓝色紫红黄绿吸收光＋透射光＝白光兰绿绿兰红橙2吸收曲线不同浓度的同一物质，在吸收峰附近吸光度随浓度增加而增大。最大吸收波长不变若在最大波长处测定吸光度，则灵敏度最高。不同物质其吸收曲线的形状和最大吸收波长各

2、不相同。显色实验准确移取10g/mL铁标准溶液5ml于50ml容量瓶中加入10％盐酸羟胺溶液1ml摇匀，稍冷加入1mol.L-1醋酸钠溶液5ml和0.1%的邻二氮杂菲溶液3ml，以水稀释至刻度。邻二氮杂菲－显色剂（生成橘红色液体）盐酸羟胺－将三价铁还原为二价铁吸收曲线－确定波长在721分光光度计上，用2厘米比色皿，以水作参比溶液，用不同的波长从570nm开始到430nm为止，每隔10－20nm测定一次吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定适宜的波长。3朗伯－比尔定律吸光度A＝lgI0/II0入射光I透射光透光

3、度T＝I/I0A=lg1/T=－lgT朗伯定律：如果溶液的浓度一定，则光的吸收程度与液层的厚度成正比。A＝lgI0/I=k1b比耳定律：如果液层厚度一定，吸光度与溶液的浓度成正比。A＝lgI0/I=k2c朗伯－比耳定律：A＝lgI0/I=abca－吸光系数,单位是L.g-1.cm-1b－以厘米为单位c－以g.L-1为单位质量浓度摩尔吸光系数＝L.mol-1.cm-14朗伯－比尔定律的推导A=lgI0/I=bcS-面积ds-被吸收的面积，ds＝adna－常数，dn－吸收光的粒子个数。ds/S=被捕获的机率Ix－入射光的光强dIx－被粒子吸收的光强-d

4、Ix/Ix=被捕获的机率-dIx/Ix=ds/S＝adn/S两边积分得：lnI0/I=an/S(1)因为lnI0/I＝2.303lgI0/I(2)(1)=(2)2.303lgI0/I=an/SS=v/blgI0/I=anb/2.303v量浓度c=n/6.02x1023v(mol/l)lgI0/I=6.02x1023abc/2.303=(6.02x1023/2.303)abc=(6.02x1023/2.303)a－常数A=lgI0/I=bc5偏离比尔定律的原因工作曲线非单色光引起的偏离化学因素引起的偏离非单色光引起的偏离因为入射光是复合光。由于物质对

5、不同波长的光的吸收程度不同，引起朗伯－比尔定律的偏移。若入射光的波长为1、2。入射光为1，A’=lgI0’/I1入射光为2，A’’=lgI0’’/I2测定时：入射光强为I0’＋I0’’透射光强为I1＋I2A=lg（I0’＋I0’’）/（I1＋I2）I1=I0’10－1bcI2=I0’’10－2bcA=lg（I0’＋I0’’）/（I0’10－1bc＋I0’’10－2bc）当1＝2，A与c成直线关系A=lg（I0’＋I0’’）/（I0’+I0’’)10－bc=lg10bc=bc当12，A与c不成直线关系，偏离定律。化学因素引

6、起的偏离朗伯－比尔定律的假设条件：1单色光2粒子之间无相互作用－在稀溶液中为什么在浓溶液中会发生偏移？在浓溶液中，粒子之间有相互作用，存在缔合、离解、互变异构、络合物的逐级生成、溶质与溶剂的相互作用。6光度计的基本部件光源单色器吸收池检测系统光度法的优点使用仪器代替人眼进行测量，消除了人的主观误差，提高了准确度。分析大批试样时，用标准曲线法可加快分析速度。选择适当的单色光和参比溶液消除干扰，提高选择性。