PT,APTT.ppt

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1、凝血实验一血浆凝血酶原时间测定（PT）实验原理：待测血浆中加入过量的含有钙离子的组织凝血活酶，血浆在组织因子存在时激活凝血因子X，Xa使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使可溶性的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定血浆凝固所需要的时间，即为血浆凝血酶原时间。PT是外源性凝血系统常用的筛检试验。方法取37℃孵育的待测血浆0.1ml，加入37℃预温的PT试剂0.2ml，混匀，立即计时，不时地倾斜试管至液体流动缓慢趋于停止时，终止计时，记录所需时间。参考值10-14s。二活化部分凝血活酶时间测定（APTT）实验原理待检血浆加入部分凝血活酶溶液，在钙离子作用下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定

2、凝固所需时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间。APTT是内源性凝血系统常用的筛检试验。方法取待测血浆0.1ml，加入37℃预温的APTT试剂0.1ml，混匀，37℃孵育5min。加入37℃预温0.025mol/LCaCl2溶液0.1ml，混匀，并立即计时，记录时间。参考值25-45s。三血浆凝血酶时间测定（TT）实验原理待测血浆加入适量的凝血酶溶液，纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需时间，即为待测血浆凝血酶时间。TT是检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的筛检试验。实验方法取37℃预温待测得血浆0.2ml，加入TT试剂0.2ml，混匀，记录凝固时间。参考值10-16

3、s四血浆D-二聚体检测（DD）实验原理以抗D-二聚体单克隆抗体标记乳胶颗粒，将标记的乳胶颗粒与待测血浆混合。当血浆中D-二聚体含量大于0.5ug/ml时，标记的乳胶颗粒发生聚集，呈现阳性反应。方法1.自冰箱中取出DD试剂盒，室温平衡30min。2.取15ulDD试剂，置于测试板的圆圈内，再加入15ul待测血浆，用搅拌棒混匀，轻轻摇动测试板5min，然后在较强光线下肉眼观察结果。出现明显均一的凝集颗粒者为阳性，无凝集颗粒者为阴性。3.半定量：将待测血浆用缓冲液作1：2等系列倍比稀释，方法同2。正常值D-Dimer阴性（D-Dimer<0.5ug/ml）静脉采血，制备血浆：静脉血置于含有

4、1/10体积的枸橼酸钠抗凝（1份抗凝液+9份全血）的塑料管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm离心15min，收集上层血浆。