实验7-植物体内硝态氮含量的测定.ppt

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1、实验8植物体内硝态氮含量的测定一、实验目的1、学会植物组织中硝态氮含量的测定方法；2、了解植物组织中硝态氮的含量。二、实验原理在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410nm，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。三、实验器材1、材料：小麦叶柄2、仪器：分光光度计3、试剂：500mg/LNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO30.7221克溶于无离水中，定容至200ml。5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（

2、密度为1.84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。四、方法步骤1.标准曲线绘测：（1）吸取500mg/LNO3-标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、6ml.8ml、10ml、12ml分别放入50ml容量瓶中，用无离子水定至刻度，使之成10、20、30、40、60、80、100、120mg/L系列标准溶液。（2）吸收上述系列标准溶液0.1ml，分别放入刻度试管中，以0.1ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml5%水杨酸一硫酸溶液，摇

3、匀，在室温下放置20min后再加入8%NaOH溶液9.5ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为10ml。（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。以NO3-N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。2.组织液NO3-N的提取（1）样品液的制备：取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2g左右，重复三次，分别放入三支试管中，加入10ml无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30min，到时间后取出，用自来水冷却，再将提取液过滤到25ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，定容至刻度。（2）样品液的测定：分别吸取样品0.1ml分

4、别于三支试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4ml，混匀后置室温下20min，再慢慢加入9.5ml8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410nm波长下测其吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3-N浓度，再用下公式计算其含量。NO3-N(mg/g)=(D×样品液总量)/样品鲜重D-NO3-N浓度五、实验思考试讨论植物不同部位硝态氮的分布特点。六、下周实验P111植物组织中可溶性糖含量测定（蒽酮法）16周、18周考试安排及要求题目：***对小麦NaCl胁迫培养的缓解作用要求：1、自己补充完整题目；2

5、、设计实验方案，内容包括实验目的、实验原理、实验器材、实验步骤、实验思考；附参考文献3、实验完成后，按照实验报告的格式写出完整的实验过程、数据记录、处理、结果分析和实验小结；4、评分标准：题目（5分）、实验目的（5分）、实验原理（5分）、实验器材（5分）、实验步骤（20分）、数据记录处理（20分）、实验分析总结（30分）、实验思考（10分）；5、期末总分=平时×30%+考试×70%；6、时间安排：14周，交实验方案；16周、17周，小麦胁迫培养及缓解培养（自己独立进行）；18周，缓解作用指标测定。