09 吸光光度.ppt

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1、第九章吸光光度法7/24/20211青岛理工大学§9.1概述也叫吸光光度法。是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。分光光度法优点灵敏准确快速选择性好7/24/20212青岛理工大学§9.2光的吸收基本定律一、物质对光的选择性吸收7/24/20213青岛理工大学△E=h1.吸收的本质：基态激发态2.物质对光的吸收具有选择性：当照射光光子的能量（h）与被照射的物质粒子的基态和激发态能量之差相当时才能被吸收。不同的物质具有不同的颜色。7/24/20214青岛理工大学3.吸收曲线：也叫“吸收光谱”。描述物质对不同波长的

2、光的吸收能力。选择测定波长的重要依据A0.1000.2000.3000.400400600C1C2C3吸收曲线7/24/20215青岛理工大学二、光的吸收基本定律——朗伯－比耳定律I0Ib朗伯定律：比耳定律：朗伯－比耳定律：176018527/24/20216青岛理工大学朗伯－比耳定律的物理意义：当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射性的吸光物质溶液时，溶液的吸光度A与溶液的浓度C和液层厚度b的乘积成正比。此定律不仅适用于溶液，也适用于其它均匀非散射的吸光物质（gas/solid），是各类吸光光度法定量分析的依据。7/24

3、/20217青岛理工大学A=εbC摩尔吸光系数的物理意义：吸光物质在特定波长和溶剂的情况下的一个特征常数。数值上等于1mol.L-1吸光物质在1cm光程中的吸光度，是吸光物质吸光能力的量度。7/24/20218青岛理工大学定量分析的依据:在多组分体系中，吸光度具有加和性。在单组分体系中，7/24/20219青岛理工大学三、偏离比耳定律特别是在溶液浓度较高时，常会出现标准曲线不成直线(如图9-4虚线所示)的现象，称为偏离比耳定律。在实际工作中AC负偏离正偏离郎伯定律永远成立！7/24/202110青岛理工大学§9.3目视比色

4、法和分光光度计一、目视比色法用眼睛观察溶液颜色的深浅来确定溶液中某种物质的含量。（准确度要求不高的常规分析）常用方法——“标准系列法”二、分光光度计分光光度法与光电比色法的比较：7/24/202111青岛理工大学光源滤光片比色池光电池检流计(混合光)(单色光)I0I光源单色器比色池光电管检流计(混合光)(单色光)I0I7/24/202112青岛理工大学分光光度法的仪器：72型/721型分光光度计组成光源单色器吸收池检测系统7/24/202113青岛理工大学（一）光源（钨丝灯）足够的光强度；一定时间内保持稳定。要求：（二

5、）单色器组成：色散元件狭缝透镜棱镜OR：光栅(单色光)I0作用：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。7/24/202114青岛理工大学滤光片的透光曲线一般滤光片的“半宽度”≥30nm棱镜纯度较高的单色光：5~10nm7/24/202115青岛理工大学（三）吸收池I(单色光)I0比色器要求：干净保护其透光面，不要用手触摸酸洗、浸泡使用同等型号的比色皿组成：无色透明、耐腐蚀的玻璃制成。作用：盛装吸收试液，能透过所需光谱范围内的光。一般为长方形液层厚度：0.5、1、2、3cm等规格7/24/202116青岛理工大学（四）检测

6、系统要求：产生的光电流应与照射于检测器上的光强度成正比。组成：硒光电池OR光电管检流计作用：将产生的光强度转变为光电流进行测量。7/24/202117青岛理工大学光电池7/24/202118青岛理工大学光电管1.阳极2.光敏阴极组成的真空（OR少量惰性气体）二极管7/24/202119青岛理工大学§9.4显色反应及显色条件的选择一、显色反应的选择（1）灵敏度高（2）选择性好:（3）显色剂在测定波长处无明显吸收。（4）生成的有色物质组成恒定,化学性质稳定。7/24/202120青岛理工大学二显色条件的选择（1）显色剂的用量:

7、M+R====MR(待测组分)(显色剂)(有色络合物)（2）溶液的酸度（3）显色温度可通过实验找出各自适宜的温度范围，最好选择室温。（4）显色时间显色时间对显色反应的影响，通常有以下四种情况：7/24/202121青岛理工大学（5）干扰的消除共存离子如本身有颜色或与显色剂有显色反应。掩蔽剂（络合∕氧化还原）：分离干扰离子：选择适当的光度测量条件：选择适当的显色条件：7/24/202122青岛理工大学三、显色剂无机显色剂：生成的有色化合物稳定性不高，灵敏度、选择性也不高。有机显色剂：生成的有色化合物稳定性高，灵敏度、

8、选择性也高。7/24/202123青岛理工大学三元络合物在光度分析中的应用特性简介：常用的有机显色剂：偶氮类显色剂：三苯甲烷类显色剂：优点大，灵敏度高；K稳大；选择性好；难溶于水。自学7/24/202124青岛理工大学7/24/202125青岛理工大学§9.5吸光度测量条件的选择一、入射光波长的选择二