果蝇的杂交实验5.ppt

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1、果蝇的杂交实验生物技术、生物科学、生态专业学时数:6学时制作人:邰丽华实验四、果蝇的杂交实验实验内容:(一)果蝇的单因子杂交实验(二)果蝇的二对因子杂交实验(三)果蝇的连锁互换杂交实验(四)果蝇的伴性遗传杂交实验(五)果蝇的三点测交实验实验目的:1、通过实验掌握果蝇的杂交实验方法。2、验证和加深理解遗传定律的原理:①分离定律②自由组合定律③连锁互换定律④伴性遗传规律⑤绘制遗传图的原理。3、记录实验结果,掌握统计处理的方法及求重组值的方法、绘制遗传图的方法。实验原理:分离定律:同源染色体上等位基因的分离自由组合定律:非

2、同源染色体上非等位基因的自由组合连锁互换定律:同源染色体上非等位基因间交换重组伴性遗传:性染色体上的基因遗传行为与性别有关(F2中正反交结果不同)三点测交:连锁基因间的距离与重组值的大小有关,则根据重组值可确定基因在染色体上的位置和排列顺序,从而作出连锁图实验材料、用具及试剂:*黑腹果蝇三隐性突变型(wmsn3)——X黑腹果蝇黑檀体突变型(e)——Ⅲ*双筒解剖镜、放大镜、培养瓶、麻醉瓶、死蝇瓶、白瓷板、毛笔、镊子、烘干箱、培养箱*乙醚、70%乙醇实验说明:1、单因子实验:P长翅++×残翅vgvg↓F1长翅+vg↓F

3、21++:2+vg:1vgvg(长:残=3:1)2、二对因子实验:P黑檀体++ee×vgvg++残翅↓F1野生型+evg+↓F2野生型:黑檀体:残翅:黑檀体、残翅9:3:3:13、连锁互换实验:P黑体+b/+b×vg+/vg+残翅↓F1野生型♀+b/vg+×bvg/bvg♂↓野生型:黑体:残翅:黑体、残翅亲组型>重组型交换→重组4、伴性遗传实验:正交:P♀红眼X+X+×♂白眼XwY↓F1红眼X+Xw、X+Y(♀、♂)↓F2♀X+X+:♀X+Xw:♂X+Y:♂XwY红眼:白眼=3:1雌性:雄性=1:1反交:P♀白眼

4、XwXw×红眼X+Y♂↓F1♀红眼X+Xw、♂白眼XwY↓F2♀X+Xw:♀XwXw:♂X+Y:♂XwY红眼:白眼=1:1雌性:雄性=1:1正反交结果不同5、三点测验P♀三隐性wmsn3×+++野生型♂wmsn3↓F1♀wmsn3×wmsn3+++↓测交后代:wmsn3+msn3w+sn3wm++++w+++m+++sn3根据测交后代8种表现型的相对频率可计算重组值,并确定基因排列顺序。6、新的实验设计选用适当的果蝇突变品系作亲本,在一次杂交实验中包括并完成相关的5个果蝇杂交实验正交:P♀黑檀体e+++×+wmsn

5、3三隐性♂e++++↓F1♀+wmsn3×e+++e++++↓F2反交:P♀三隐性+wmsn3×e+++黑檀体♂+wmsn3e↓F1♀+wmsn3×+wmsn3♂e+++e↓F2在F1的杂交中:对e基因(Ⅲ)——F1自交对wmsn3(X)基因——F1测交实验步骤:1、分别培养三隐性和黑檀体果蝇,从子代中分别挑选出处女蝇和雄果蝇。2、三隐性和黑檀体果蝇进行正反交,23℃培养。3、7~8天后移去亲本,待F1成蝇出来后观察记录F1的性状。正反交产生的F1不必挑处女蝇。4、将F1雌雄果蝇进行自交(反交实际上是测交),把20~

6、30对雌雄果蝇放到新的培养瓶中(正反交各5瓶,每瓶5~6对),23℃培养。5、7~8天后移去F1,待F2成蝇出来后观察性状,并记录统计数量(观察的性状为:眼色、翅形、刚毛、体色),连续统计8~10天。要求至少各统计250只果蝇。实验结果的统计处理:待F1或F2成蝇开始出现后,检查其性状,将结果填入表1和表2。表1F1表型观察统计表表型正交后代数目反交后代数目体、眼、刚毛、翅♀♂合计♀♂合计灰、红、直、长灰、白、焦、小表2F2表型观察统计表表 型  正交F2数目    反交F2数目(测交后代)♀ ♂ 合计  ♀♂  合

7、计1 ++++2 +wsnm3 ++snm4 +w ++5 +w+m6 ++sn+7 +wsn+8 +++m表2F2表型观察统计表(续表)表 型  正交F2数目    反交F2数目(测交后代)♀ ♂ 合计  ♀♂  合计9e+++10ewsnm11e+snm12ew++13ew+m14e+sn+15ewsn+16e++m实验结果的分析:1、分离规律的验证考虑常染色体上一对等位基因(+—e)所控制的灰体和黑檀体这一对相对性状的杂交结果。F1的观察结果:体色——灰体/黑檀体F2的观察结果:表3F2表型观察统计表表型正交后

8、代数目反交后代数目体色♀♂合计♀♂合计灰体黑檀体F2的表型产生3:1的分离对实验结果(正反交)进行Χ2测验2、自由组合规律的验证只考虑正交实验中体色(ee++)和翅形(++mm)两对相对性状的杂交结果。F1的观察结果:体色和翅形F2的观察结果:表4F2表型观察统计表表型正交后代数目体色、翅形♀♂合计灰体、长翅黑檀体、长翅灰体、小翅黑檀体、小翅F

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