第八章 吸光光度法.ppt

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1、第八章吸光光度法ξ8-1概述ξ8-2光的吸收基本定律ξ8-3方法与仪器ξ8-4显色反应及显色条件的选择ξ8-5吸光度测量条件的选择ξ8-1概述利用物质的光学性质来进行分析的方法。从现在开始我们所接触的内容为仪器分析（简单仪器分析），仪器分析主要测定微量组分，0.1%以下，（常量100~1%，微量1~0.001%，痕量<0.001%）。那么我们判断一下下列情况能否用化学分析吗？nAnBa=1b=6∴计算得：Ｖ＝0.01865ml＝0.02mlξ8-1概述一般滴定管的误差为±0.01ml，(0.02ml)，∴不能用滴定法，也不能用重量法，含量太小，误差大。含铁量为0.001%试样，称取一克，

2、用标液滴定，用去多少毫升？1g试样含纯铁：1×0.001%=0.01mgξ8-1概述可以这样：待测组分有色溶液ξ8-1概述溶液浓度小：色浅橙红色络合物一定体积时：溶液浓度大：色深这种利用物质颜色深浅不同，测定改种有色溶液的有色物质浓度的方法——比色分析法。它的基本依据：有色物质对光的选择性吸收作用。ξ8-1概述那么吸光光度法（分光光度法）也是基于有色物质对光的选择性吸收作用，利用测试仪器——分光光度计比色分析可见红外紫外，荧光等吸光光度法光度法光电比色（光电比色计）分光光度计法——分光光度计这种分类方法，采用名词不同，是因为仪器的不同或发展的历史不同，实际上都称为吸光光度法，都是基于物质

3、对光的选择性吸收作用。ξ8-1概述一、吸光光度法的特点：1.灵敏度高：1~10-3%微量分析，甚至达10-4~10-5%痕量2.准确度高：相对误差5~10%比色2~5%分光光度，一般不超过6%3.应用广泛：几乎所有的无机离子和许多有机化合物4.操作简便，快速，仪器设备不复杂ξ8-1概述二、吸光光度法的基本原理：1.光的基本性质光的波动性：参数——λ：波长；υ：频率；C：光速，关系：C=λν光的粒子性：光电效应，光的吸收，发射等把光看作是带有能量的粒子流微粒：光子能量：——E决定于λν，波粒关系：ξ8-1概述λν=CλE小紫外10~400nmE大可见400~780nm↓红外780~3000

4、nmξ8-1概述波长越长，能量越小，红外光对人无多大害处，但紫外光或更短的波长对人有害。单色光——由能量和波长相同的光所组成的光子流，（波长相同的光）复合光——波长不同的光所组成的光，例如白光400~780nm由各种波长和能量的光所组成的红橙黄……可见光ξ8-1概述2.物质对光的选择性吸收当光束照射到有色物质上时，光与物质发生相互作用，于是就产生光的反射、散射、吸收、透射等现象白光入射400~780nm反射反射光很小吸收散射均匀溶液可忽略透射刺激人眼而使人感觉到颜色的存在ξ8-1概述看见的光是不被吸收而透过的光（眼睛所观察到的）吸收的光不被看见两种颜色（互补色）——我们人眼能看到谁哪？∴

5、透射光——吸收光（互补色光）例如：CuSO4直观为蓝色，吸收黄色580~600nmKmnO4紫红色吸收500~560nm绿色H2O无色，没有吸收透射蓝色透过紫红ξ8-1概述物质颜色与吸收光颜色的互补关系物质颜色吸收光颜色波长/nm黄绿黄橙红紫红紫蓝绿蓝蓝绿紫蓝绿蓝蓝绿绿黄绿黄橙红400~450450~480480~490490~500500~560560~580580~600600~650650~780ξ8-1概述我们穿的衣服，所看到的各种大自然中的各种颜色，都是由于物质对可见光的吸收显示出来的。所以：不同物质对光有选择性吸收，使得各种物质具有不同颜色。ξ8-1概述为什么有吸光现象？选择

6、性吸收？(1).吸光现象10-8秒，以热或荧光形式放出激态基态物质粒子与光子碰撞能量转移，这个作用叫光的吸收。ξ8-1概述(2).选择性吸收①激发态粒子约10-8秒后回到基态，吸收的能量以热或荧光等形式释放②每种物质其结构不同，具有不同的量子化能级，对光的吸收不同，当照射光的能量hν与被照射物质粒子的基态与激发态能量之差相当时才发生吸收，发生电子跃迁，呈现不同颜色，物质对光有选择性吸收。ξ8-1概述3.吸收曲线（吸收光谱）表示光吸收程度的量有：A吸光度D光密度E消光值0.0004mg/ml0.002mg/ml0.0006mg/ml0.3000.2000.100λ(nm)600500吸收最

7、大波长为510nm（绿色）,600nm左右的橙红色光几乎无吸收ξ8-1概述①浓度越大，吸收越大（A越大）②A最大所对应的波长为最大吸收波长（λmax）③λmax不随浓度的变化而变化这是为什么？这是由物质的量子化能级决定的ξ8-1概述结论：利用物质对不同的波长具有选择性吸收，而且浓度不同对光吸收的程度不同来测定含量定性：利用λmax——不同物质其吸收曲线的形状和λmax不同定量：的关系，在不同λmax下测定A值。换算含量。ξ8-2光的