毛细管电泳-非接触式电导分离检测食品中天然甜味剂.ppt

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1、毛细管电泳-非接触式电导分离检测食品中天然甜味剂的研究SeparationandDeterminationofNaturalSweeterinFoodsbyHighPerformanceCapillaryElectrophoresiswithContectlessConductivityDetection报告人：李慧晶指导老师：谢天尧副教授内容概要实验部分2实验总结4机理探讨3前言1人工合成甜味剂天然甜味剂甜味剂蔗糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖、蜂蜜、甜菊苷等阿斯巴甜、糖精、甜蜜素、帕拉金糖、安赛蜜、纽甜等据一

2、报道称，2003年9月下旬，我国出口到日本的速冻类、酱菜类、罐头类等食品皆因甜蜜素问题受阻。有专家则认为，甜蜜素是一种无营养甜味剂，有致癌、致畸、损害肾功能等副作用，有的发达国家已全面禁止在食品中使用甜蜜素。我国对糖精钠、甜蜜素、安赛蜜的使用量有限制，且在婴幼儿产品中禁止使用糖精钠！课题背景“零度”(ZERO)可口可乐——用阿斯巴甜代糖取代天然甜味剂，使其虽然无糖却有甜味。近日，这种可乐受到广泛的争议。每100mL“零度”可乐含只含0.3kCal的热量，而普通可乐45kCal/mL。“零度”可口可乐真的不

3、含有天然甜味剂吗？课题背景仁果类(苹果、梨)以果糖为主，蔗糖、葡萄糖次之核果类(桃、杏)以蔗糖为主，葡萄糖、果糖次之浆果类(葡萄、草莓、猕猴桃)葡萄糖和果糖柑桔以蔗糖多各种水果中所含糖的种类是不一样的对糖尿病人更适宜比葡萄糖易于吸收、利用果糖由于口腔的细菌将食物中的蔗糖成份转换成酸，从而侵蚀牙齿的珐琅质蔗糖导致蛀牙课题背景糖的检测难度大，是分析化学界公认的难题：（4）化学结构非常相似，异构体很多分离困难（1）熄灭系数很低很难直接荧光检测（3）不易挥发很难用气相色谱(GC)直接分析（2）极性极强，亲水很难用

4、传统的反相HPLC或SFC(超临界流体色谱)直接分析，而必须借助于衍生课题背景目前检测糖的方法存在的问题：课题背景课题研究的内容为此，本课题提出采用高效毛细管电泳-非接触式电导法，建立快速、灵敏和低成本的食品中天然甜味剂的分离分析新方法。分离分析原理毛细管电泳是指离子或带电粒子以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间的淌度和分配行为上产差异而实现分离的分析技术。是近十几年发展起来的液相分离分析新方法。非接触式电导检测原理电容耦合非接触式电导检测（C4D）是近年来发展起来一种新型的电

5、导检测方法。由于非接触式中电导电极与溶液隔离，避免了因电极与溶液接触而造成的诸多问题，彻底地消除了电极吸附（中毒）的问题，电极寿命长，抗干扰能力强。同时，C4D检测池结构简单，电极容易固定，对毛细管直径没有限制，可使用内径为5μm的毛细管。正是因为C4D检测具有通用、灵敏、适用性强、重现性好等优点，研制更优性能的C4D检测器及其应用研究成为了当前CE研究中的一个热点。非接触式电导检测原理非接触式电导检测原理非接触式电导检测仪非接触式/接触式双通道电导检测器的实物图（谢天尧老师课题组研制）二、实验部分仪器试

6、剂条件确定样品测定实验仪器CES2008型毛细管电泳仪（谢天尧老师课题组研制）毛细管电泳数据工作站（软件）试剂氢氧化钠（广州化学试剂厂）无水磷酸氢二钠（广州化学试剂厂）十六烷基三甲基溴化铵（上海伯奥生物科技有限公司）水为超纯水石英毛细管（25微米内径，365微米外径，有效长度为40厘米）为河北永年色谱器件有限公司生产。Na2HPO4Na2HPO4+硼砂NaOHNa2HPO4+硼砂+CTABNa2HPO4＋NaOHNaOH＋Na2HPO4＋CTABNaOH＋Na2HPO4＋CTAB体系基线平稳，信噪比高，分

7、离度和灵敏度最佳。电泳运行液的选择NaOH浓度的影响√结论：10mmol/LNaOH分离效果好，出峰快。浓度太小，糖被络合得不完全迁移时间提前，峰形宽钝浓度太大时，峰形变得尖锐但基线不稳，分离度也下降考察了NaOH浓度分别为6mmol/L8mmol/L10mmol/L12mmol/L14mmol/L16mmol/L对三种糖的分离情况Na2HPO4的影响浓度过低时，糖被络合得不够完全，体系的离子强度太小反映在电导上，就会导致信号强度过小，难以检出浓度过高时，过量的负离子会干扰络合离子，体系离子强度过大，会导

8、致基线不稳，同样不利于分离。考察了Na2HPO4浓度分别为1.5mmol/L-----检不出果糖3.5mmol/L-----基线平稳，分离效果较好5.5mmol/L-----基线不平稳，峰形较宽，分离度不好√电渗流改进剂（CTAB)的影响CTAB是电渗流改向剂。添加CTAB，可以减少电渗流，能在阳极端有效地检测被测组分离子。CTAB的加入量200mol/L为最佳。12kV结论：电压较低，分离度增大，灵敏度高，但分离时间较长；