DB21∕T2716.2-2016中间球和光棘球海胆种质第2部分光棘球海胆种质.pdf

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1、ICS65.150B51DB21辽宁省地方标准DB21/T2716.2—2016中间球和光棘球海胆种质第2部分光棘球海胆种质StrongylocentrotusintermediusandStrongylocentrotusnudusPart2Strongylocentrotusnudus-2016-11-18发布2017-01-18实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2716.2—2016前言本标准根据GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由大连市质量技术监督局提出。本标准由辽宁省海洋与渔业厅归口。本标准主要起草单位：大连海洋大学。本标准主

2、要起草人：常亚青、宋坚、赵冲、张伟杰。本标准于2016年11月18日首次发布。附录A为资料性附录。IDB21/T2716.2—2016中间球和光棘球海胆种质第2部分光棘球海胆种质1范围中间球和光棘球海胆种质包含两部分,本部分为第2部分光棘球海胆种质,本部分规定了光棘球海胆（Strongylocentrotusnudus）的名称与分类、主要形态特征、繁殖、细胞遗传学特型、分子遗传学特性、检测方法和判定规则。本部分适用于光棘球海胆的种质检测与鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不

3、注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.2—2008养殖鱼类种质检测第2部分：抽样方法。GB/T18654.12—2008养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析。3名称与分类3.1学名光棘球海胆（Strongylocentrotusnudus）。3.2分类地位隶属于棘皮动物门（Echinodermata）、游在亚门（Eleutherozea）、海胆纲（Echinoidea）、正形目（Centrochinoida）、球海胆科（strongylocentrotidae）。4主要形态特征4.1外部形态特征外壳呈半球

4、形，壳高大于壳径的1/2，最大壳径可达100mm，口面平坦，围口部稍向内凹；反口面隆起，顶部呈圆弧形。布带区与间布带幅度不等。成体表面以及大棘的色泽均呈黑紫色，管足为紫色或紫褐色。大棘针形，较粗壮，表面带有极细密的纵刻痕，赤道部的大棘长约25mm～40mm。1DB21/T2716.2—2016aa反口面b口面图1光棘球海胆的外部形态4.2内部构造4.2.1口器口器位于口面中心，由5个大而尖锐的大齿、5个大齿骨、若干块小齿骨以及与之相连肌肉束组成。4.2.2消化道分为咽、食道、胃、肠、直肠5部分。食道呈短管状，前端接于咽、后端接于胃。具有与胃相关的虹管。咽

5、和食道内具有粘液细胞。4.2.3神经系统由表皮神经系、反口极神经系和深在神经系组成。4.2.4管足系统由步管环、辐步管及其支管、石管、波里氏囊、坛囊、管足组成。4.2.5循环系统由背血管、腹血管、辐血管、血管环以及分支血管组成。4.2.6生殖腺生殖腺5对，由肠系膜悬挂于各生殖腔间步带内侧，呈纺锤状。4.2.7围口鳃围口鳃5对，常在壳缘处形成鳃裂。2DB21/T2716.2—2016图2光棘球海胆内部构造5繁殖5.1性成熟年龄与性腺特征雌雄异体，雌雄外观上无区别，生殖腺5对，呈瓣状分布，性成熟年龄为两周年，成熟季节生殖腺色泽淡黄色至橙黄色。5.2生物学最小

6、型壳径4.0cm～4.5cm。5.3性比性比接近1:1。5.4繁殖期辽宁地区在7月中旬至9月中下旬。5.5产卵量壳径在6.0cm～8.0cm的光棘球海胆产卵量为400万粒～600万粒。5.6精卵特征精子全长20μm～30μm，分为头部、中段和尾部三部分。卵为沉性卵，卵径110μm～130μm。6细胞遗传学特性体细胞染色体数目2n=42。7分子遗传学特性线粒体DNACOⅠ基因片段长度为1212bp，其序列（GenBank序列号：JN716398.1）见附录A。3DB21/T2716.2—20168检测方法8.1抽样应按照GB/T18654的第2部分（抽样方

7、法）的规定执行。8.2形态构造肉眼观察，并结合游标卡尺测量。8.3染色体和核型检测8.3.1染色体标本的制备8.3.1.1应用去核的光棘球海胆卵子破碎体与正常的光棘球海胆精子制得具有分裂能力的光棘球海胆受精卵，取其桑葚期个体若干，浓缩，放于10ml离心管中，加入海水配置的0.05mol/L的秋水仙素5ml～8ml，静置30min～50min。8.3.1.2用7％～10％柠檬酸钠溶液低渗10min。8.3.1.3卡诺固定液固定3次，每次15min～20min。8.3.1.450％冰醋酸解离数分钟,轻轻吹打。8.3.1.550℃温片滴片。8.3.1.6烘干后

8、10％Giemsa染液（pH值6.8）染色30min。8.3.1.7自来水冲洗，