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《血小板自身抗体的流式细胞检测与意义.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、医学研究杂志2008年11月第37卷第11期论著血小板自身抗体的流式细胞检测与意义吴蓓倩朱萍牛强陈字谢毅摘要目的应用流式细胞仪(FCM)检测血小板抗体,研究其正常参考值及对特发性血小板减少性紫癜(ITP)诊断的价值。方法应用FCM检测20例正常人和10例ITP患者血小板表面抗血小板抗体,并与酶联免疫竞争抑制试验(ELISA法)进行比较。结果FCM检测20例正常人血小板表面IgG、IgA和IgM的荧光百分率分别为256208%、1375598%and1390728%;ITP患者血
2、小板表面IgG、IgA和IgM荧光百分率分别为28131774%、25071684%和23221785%。结论FCM对于检测血小板表面血小板相关抗体是快速、敏感的新方法,优于ELISA方法。关键词流式细胞仪血小板抗体特发性血小板减少性紫癜FlowCytometryDetectionofPlateletAssociatedAntibodyinPatientswithIdiopathicThrombocytopenicPupura.WuBeiqian,ZhuPing,NiuQiang,ChenZi,XieYi.Hem
3、atologyDepartment,HuashanHospital,FudanUniversity,Shanghai200040,ChinaAbstractObjectiveTosetupamethodofdetectingplateletassociatedantibody(PAIg)byflowcytometry(FCM),andtoinvestigatethevalueofFCMmethodinthediagnosisofidiopathicthrombocytopenicpurpura(ITP).MethodsWedetec
4、tedtheplateletassociatedantibodyof20healthydonorsand10patientswithITP.ThesesampleswerealsomeasuredwithELISA.TheresultsofFCMwerecomparedwiththeresultsofELISA.ResultsByFCM,themeasuredvalueofPAIgG,PAIgAandPAIgM,from20normaldornors,were256208%、1375598%and1390728%,r
5、espectively.InpatientswithITP,PAIgG,PAIgAandPAIgMwere28131774%、25071684%and23221785%.ConclusionFCMcanbearapid,sensitiveandnewmethodindetectingplateletautoantibody,andhasbetterpotentialthanELISA.KeywordsFlowcytometry;Plateletassociatedantibody;Idiopathicthromboc
6、ytopenicpurpura特发性血小板减少性紫癜(ITP)是由于患者体内min离心10min,倒置弃尽上清,加入03%PBS/BSA,配成悬产生抗血小板抗体与血小板结合后导致了血小板被自液,Falcon管中加入血小板悬液50、lFITC-抗人IgG(或FITC-抗人IgA、FITC-抗人IgM)再加入CD61-FITC。暗处身破坏。血小板自身抗体的检测对于ITP的诊断和治孵育30min+PBS1ml洗涤2次,再加入05mlPBS后混匀后疗有重要意义。我们建立了FCM检测血小板自身抗上FCM检测。氩激光激发波长为488nm,使用
7、CellQuesy软件体的方法,并与酶联免疫竞争抑制试验(ELISA法)做分析程序,每份标本检测5000~10000个细胞,根据CD61设了初步比较,探讨其对ITP诊断的价值。门,以阴性对照管调整电压,然后检测标本PAIgG、PAIgA、资料与方法PAIgM。(2)ELISA法:按照说明书,分离血小板,洗涤血小1.研究对象:正常对照组为正常献血员,共20例,其中男性8板,计数,溶解血小板,离心沉淀,上清100l加入酶标板,然例、女性12例,年龄22至40岁。ITP病人10例,男性4例,女性6后加入酶标抗体,混匀后置371h,取出酶标板,
8、用专用洗涤[1]例,年龄20~77岁,其中ITP10例,均符合国内诊断标准。液洗4次,加入底物100l/孔,37孵育10min,加入终止剂2主要仪器和试剂:流式细胞仪FAC
