浅谈毛细管电泳.

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1、浅谈毛细管电泳摘要：本文介绍了毛细管电泳以及电化学检测法。叙述了各种分离模式和检测方法，并评述了近六年来，毛细管电泳电化学检测法在药物分析中的应用进展。关键词：毛细管电泳；电化学检测法；药物分析；综述毛细管电泳具有分离效率高'快速和所需样品量少等特点。应用范围包括无机离子、有机分子及生物大分子和对映体等，在分析化学、生物化学、分子生物学、药物化学、食品化学、环境化学和医学许多领域，有着广阔的应用前景。毛细管电泳（E）又称高效毛细管电泳（HPE）或毛细管电分离法（ES）,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离

2、分析技术，具有分离效率高（理论塔板数已达106-107/）、快速（一般20in内即可完成一次电泳操作，甚至几分钟即可完成几十个阳离子或阴离子的分离）、样品用量少（仅需纳升级）等特点。在近十几年中，E受到分离分析科学家的极大关注，成为生物化学和分析化学中最受人礪目、发展最快的一种分离分析新技术。1分离模式毛细管电泳按分离模式的不同主要可分为ZE,E、GE、IEP、ITP、AE（亲和毛细管电泳）、AE（毛细管阵列电泳）等。2检测技术E的检测技术以其高效、微量、快速等特点引起了广泛的重视，因为毛细管内径极小（通常为2-100微米）和纳升

3、级的进样量，对检测器的灵敏度要求很高。检测是E中的关键问题。目前己有多种检测器成功地用于E中。检测器检出限（I/L）特点检测器检出限（I/L）特点紫外可见吸收激光光热荧光非相干光诱导激光诱导折射指数10——10-610-7—10-810-7—10-810-10—10-1210——10-7近似通用，常规应用灵敏度咼受激光波长限制灵敏度咼灵敏度高，价格高通用，简单，灵敏度低电导安培质谱放射间接紫外间接安培法10——10-710-8—10-910-7—10-910-9—10-1110-4—10-10——10-6通用灵敏度高，选择性好，微

4、量仪器复杂，可获得结构信息灵敏度高，特殊操作E中应用最广泛的是紫外/可见检测器，其灵敏度低，但通用性好，十分适合小分子的分析。缺点是受毛细管狭窄内径的限制，有效光程短，其灵敏度相对较低（一般为10—10-6I/L）O激光诱导检测器灵敏度可比紫外可见检测器高1000倍,但是造价昂贵，且大多数样品需要衍生。联用技术是解决毛细管电泳定性问题的最佳方法。与E联用的检测器必须有较小的体积和较高的灵敏度。己经有许多检测器被成功地运用于E技术中，商品化仪器中常用的检测器主要是紫外可见检测器，但是毛细管的短光程严重限制了它的灵敏度［门。激光诱导荧

5、光检测器虽然灵敏度高，选择性好，缺点在于仅适合于具有荧光或易于进行荧光衍生的物质［2］［3］。E-S联用法灵敏度高，专属性强，能提供分子结构信息，是E非常理想的一种检测器，但是价格昂贵［4］。电化学检测器与E联用不仅可满足分析微量样品时灵敏度的要求，而且有良好的选择性，仪器造价低廉，易于普及。电化学检测对于大多数易于氧化还原物质的浓度检测限可达10-9I/L(质量检测限可达10-121—10-181)o3E电化学检测的基本模式E电化学检测有三种基本模式:安培法、电导法和电位法□o安培法测量化合物在电极表面受到氧化或还原时，失去或得

6、到电子，产生与分析物浓度成正比的电极电流。电导法和电位法是测量两电极间由于离子化合物的迁移引起的电导率或电位变化。安培法是E-ED中应用最广泛的一种检测技术。4毛细管电泳电化学检测法在药物分析中的应用近年来毛细管电泳在药物分析中的应用得到了迅速的发展。在中药材'中成药制剂'西药复方制剂及生物技术产品等药物和制剂的分离、鉴定和分析中，显示了高效果、快速的特点，正越来越受人们的重视。4.1.1一般药物黄宝美、莫金垣［6］采用毛细管电泳柱端安培检测法测定了脂可平胶囊中的姜黄素。谢玉璇'谢天尧等［刀采用毛细管电泳-电导法分离磺胺药物，磺胺

7、卩密唳、磺胺甲卩密唳'磺胺二甲卩密唳3种结构相近磺胺药物。汪尔康［8］采用碳纤维电极E-ED分离了局部麻酉竿要普鲁卡因和利多卡因。4.1.2抗生素药物单瑞峰等［9］采用高效毛细管电泳-电化学检测法测定了氯霉素针剂和氯霉素片中的氯霉素的含量。alne等［10］利用E-ED直接测定人血清中的丝裂霉素。吴明嘉等［门］利用柱端检测模式测定了尿样中的异丙嗪。方禹之等以各种金属盘电极作检测电极用于双氢链霉素、小诺霉素、林可霉素、卡那霉素等九种多轻基抗生素的分离分析检测H2,13,14］。4.1.3复方制剂E-ED在药物分析中的另一应用是用来分

8、离测定复方制剂中的有效成分。方禹之等用E-ED分离分析测定复方磺胺类药物［"'三磷酸腺昔［16］o4.1.4手性分离当今化学和医学中，生物物质对映体的分离，特别是在生命界具有不同生物活性的对映体的分离，引起人们极大的研究兴趣。近年来E在手性分离起着