2019-2020年高考生物二轮复习核心考点之提分冲刺专题16基因工程与细胞工程

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1、2019-2020年高考生物二轮复习核心考点之提分冲刺专题16基因工程与细胞工程[重温考纲] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。核心考点1 基因工程与蛋白质工程一、要点整合1.掌握基因工程的3种基本工具(1)限制性核酸内切酶:识别特定核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子。(2)DNA连接酶:①E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端;②T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。(3)载

2、体:①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;②有一个至多个限制酶切割位点;③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。提醒 (1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在特定的位置断开;DNA酶是将DNA水解为基本组成单位;解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。(2)使用限制酶的注意点①一般用同种限制酶切割载体和目的基因。②不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。(3)DNA连接酶≠DNA聚合酶DNA连接酶连接两个DNA片段,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。2.理清基因工程的操作流程

3、(1)获取目的基因的3种途径①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增。③化学方法人工合成。提醒 (1)PCR技术扩增①原理:DNA双链复制。②条件:模板DNA、引物、脱氧核苷酸、热稳定性DNA聚合酶。③过程、(2)化学方法人工合成已知核苷酸序列的较小基因,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板。(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建①基因表达载体的组成②构建过程提醒 (1)基因工程中的载体与细胞膜上的载体不同。(2)启动子、终止子①启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上)。②终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA上)。(3)目的基因

4、插入位置:启动子与终止子之间。(3)根据受体种类确定基因工程的受体细胞①植物:植物体细胞或受精卵——导入方法常用农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法(本法针对单子叶植物)②动物:受精卵或体细胞——导入方法为“显微注射法”③微生物:细菌——导入方法为“感受态法”(4)目的基因的检测与鉴定的方法①检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。②检测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。③检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原—抗体杂交技术。④个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。3.理清蛋白质工程二、考向设计1.(xx·全国Ⅰ,38)真核生物基因中通常有内含子,

5、而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

6、__________________________________________________________________。(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用__________作为载体,其原因是_________________________________________。(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体,因为与家蚕相比,大肠杆菌具有___________________________________________________________________(答出两点即可)等优点。(

7、4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是___________________________________________________________________________________________________________________________________________

8、____________

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