人工感染3种致病弧菌对大黄鱼7种酶活性的影响【开题报告】

人工感染3种致病弧菌对大黄鱼7种酶活性的影响【开题报告】

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1、毕业论文开题报告水产养殖人工感染3种致病弧菌对大黄鱼7种酶活性的影响一、选题的背景与意义大黄鱼Pseudosciaenacrocea(Richardson)是我国主要海产经济鱼类之一,随着大黄鱼人工育苗技术的完善,其养殖规模也迅速扩大,但随着养殖密度的加大及日常不科学的管理措施,疾病的流行和危害也日益严重。近年来浙江、福建等各省网箱养殖的大黄鱼经常发生一种皮肤溃烂病,其主要症状为:体表褪色、呈浅黄色、有出血点,头部、尾部皮肤溃烂,病鱼的尾柄被严重腐蚀,大多数病鱼都露出尾椎骨;肌肉充血,部分病鱼的身体一侧或两侧鳞片成片脱落,下颌、鳍基部充血,病

2、鱼离群独游。解剖发现:肝脏肿大、土黄色,有腹水,肠与腹部粘连。许多学者已对网箱养殖大黄鱼溃疡病的病原菌进行了分离鉴定等研究,引起该病的病原菌主要是溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌。鱼类作为低等脊椎动物,在感染各种病原细菌时,主要依赖先天性的非特异免疫来抵御病原细菌感染。然而,有关大黄鱼抗感染的非特异性免疫机能研究很少,仅有的报道也是针对一种病原菌的感染后分析,尚未见有关引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌之间的毒力差异及对大黄鱼免疫功能影响的差异性比较研究。从免疫学角度,提高鱼体非特异性免疫机能从而提高其抗病力,减少疾病发生已成为水产动物疾病预防与控

3、制研究领域的热点。本研究通过人工感染引起大黄鱼溃疡病的多种病原菌后,分析大黄鱼血清7种酶活性的变化特点,比较研究其致病机理和规律,对丰富大黄鱼免疫防御机制的理论基础、免疫增强剂的筛选及提高免疫防治技术都具有重要理论意义和应用价值。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题:研究的基本内容:1.解明人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌后,分别对大黄鱼7种免疫酶指标的影响。2.比较引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌对大黄鱼机体损伤的毒力差异。3.比较引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌对大黄鱼各项非特异性免疫指标之间的差异及相关性。4.评价大黄鱼抗感染的非特异性

4、免疫防御功能及其机理。拟解决的主要问题:1.7种非特异性免疫酶指标的选定2.大黄鱼抗感染的非特异性免疫防御功能及其机理分析三、研究的方法与技术路线:(一)研究方法以腹腔注射的方式,分别人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌后,0h,6h,12h,24h,48h,72h,96h后各取6尾大黄鱼,尾静脉取血,4℃静置过夜后取血清。按以下方法进行大黄鱼溃疡病的7种免疫酶指标变化分析。1.溶菌酶(LZM)的测定采用Hultmark等的方法进行测定。2.碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、髓过氧

5、化物(MPO)等总抗氧化能力的测定均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行。3.酚氧化酶(PO)的测定采用参考Ashida的方法进行,并加以改进。(二)技术路线碱性磷酸酶(AKP)酸性磷酸酶(ACP)超氧化物歧化酶(SOD)过氧化物酶(POD)髓过氧化物(MPO)酚氧化酶(PO)溶菌酶(LZM)大黄鱼患溃疡病后非特异性免疫机能的影响分析人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌,对照组大黄鱼溃疡病病原菌的选定非特异性免疫指标的选定四、研究的总体安排与进度2009.12-2010.1毕业论文选题2010.1-2010.3进行文献查阅和资料收集,制定

6、具体研究计划和试验方案。2010.3-2010.4撰写综述和开题报告2010.4开题报告答辩2010.4-2010.12实地采样、试验研究、数据处理和分析2011.2-2010.3完成外文翻译2011.3-2011.4论文撰写2011.4-2011-5提交并答辩五、主要参考文献:[1]陈昌福,罗宇良,蔡冰,等.饲养水温对草鱼溶菌酶活性的影响[J].中国水产科学,1996,3(3):26-28.[2]金珊,王国良,赵青松,等.海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的流行病学研究[J].水产科学,2005,24(1):17-19.[3]林克冰,周宸,刘家富,等

7、.海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的病原菌[J].台湾海峡,1999,18(30):342-347.[4]苏跃中,游岚.网箱饲养的大黄鱼病害防治[J].水产科技情报,2000,27(2):179-183.[5]苏永全,张彩兰,王军,等.大黄鱼养殖[M]:北京:海洋出版社,2004,1-10.[6]孙建和,严亚贤,陈怀青,等.鲫鱼的细胞免疫应答研究[J].上海农学院学报,1998,16(2):89-91.[7]孙峰,张煜,李立德,等.感染嗜水气单胞菌对鲫鱼非特异性免疫功能的影响[J].中国海洋大学学报,2005,35(5):815~818.[8]王军,

8、苏永全,张朝霞,等.闽南地区养殖大黄鱼细菌性疾病的病原生物学研究[J].厦门大学学报(自然科学版),2001,40:85-91.[9]王军,鄢庆枇,苏永全,等.免疫

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