彭英论文修改版（终）

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1、学校代码:10661专业代码：100304中图分类号：学生学号：1110850101連义医学院本科生毕业论文（设计）论文题目：Lass2通过NF-kB途径调控肝癌细胞的增殖与凋亡姓名：彭英部系：检验系专业：医学检验专业年级：2011级联系电话:18275616764E-mail:1215260001@qq.com指导教师：杨艳遵义医学院教务处制2016年4月25日摘要IAbstractII,1/a.、•刖§1.材料与方法1・1实验动物与材料1・2方法及步骤2.结果2・1肝内成瘤的情况2.2各组小鼠肝组织病理学改变2.3Lass2过表达的验证2.4MTT法分

2、析Lass2基因过表达对Hepal-6肝癌细胞增殖的影响2.5PI染色流式细胞术测定细胞增殖指数82・6Westernblot检测各组小鼠肝组织中NF-kB蛋白的相对表达水平・・・83.讨论94.小结参考文献11译文12致谢17厶mss2通过NF-kB途径调控肝癌细胞的增殖与凋亡摘要目的初步探讨ZssZ基因通过NF-kB途径对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法健康雌性C57小鼠，普食喂养至8周龄，采用Hcpal-6肝癌细胞悬液肝内注射法构建原位肝癌模型，超声初步检查肿瘤的形成，注射10d后随机分为：NC组（正常同周龄C57小鼠）、HCC-N组

3、（原位肝癌小鼠模型空载对照组）、HCC-L组（pF俯-"ss纟质粒注射组），采用流体力学尾静脉分次加强即25ug/次，24h后再次加强注射转染裸质粒，取齐组小鼠肝脏进行病理学检查并提取RNA和蛋口质，QPCR法检测厶臼ss2表达水平‘Westernblot检测分析NF~kB蛋白表达水平；采用脂质体转染法将pEGFP-重组质粒转染IIcpal-6肝癌细胞，Westernblot法厶日基因过表达细胞的鉴定，MTT法以及流式细胞术法检测分析对照组与转染组Hepal-6细胞增殖的情况。结果超声检查均见低密度回声影，结果与剖腹探查所见一致，病理学结果提示IICC-L

4、组小鼠成瘤肝小叶较IICC-N组瘤细胞数、核异质性及核分裂彖明显改善；IICC-L组小鼠肝组织氏ssGiRNA相对表达水平较HCC-N组明显上调（mRNA水平"<0.01）,且NF-kB蛋口相对表达水平较HCC-N组显著降低（戶<0.01）；MTT法检测显示Lass2基因过表达能够抑制Ilcpal-6肝癌细胞的活力，差异有统计学意义（户<0.05）；PI染色流式细胞术分析结果显示基因过表达后抑制了肝癌细胞的生长，细胞增殖指数明显降低（P<0.05），并使G0/G1期细胞明显增多从而减速肝癌细胞周期进程。结论流体力学尾静脉注射方式使山ss刃贡粒在小鼠肝内有效

5、过表达；上调的Lass2基因能够抑制Hcpal-6肝癌细胞体外增殖；氏ss幺基因过表达对肝癌细胞增殖与凋亡的影响可能是通过下调NF-kB信号通路实现的，这可能是山ss幺抑制肝癌细胞生长的作用机制之一。关键词：Lass2；原发性肝癌；NF-kB信号通路；细胞增殖Longevityassurancegene2throughtheNF-kBpathwayregulatinghepatocellularcarcinomacellsproliferationandapoptosisAbstractObjectiveToinvestigatetheinfluenceo

6、fLass2geneuponproliferationandapoptosisinhepatocellularcarcinomacellsthroughNF・kB,andtoexploreitspossibleactionmechanismsMethodHealthyfemaleC57micewithabout15gwereprepared(normallyfedto8weeksofage)•Constructorthotopicmodelofhepatocellularcarcinomacellsbymeansofintrahepaticinjectio

7、nofHepal-6cellsuspension.Preliminarilychecktumorformationwithultrasound.Randomlydividethemiceintothreegroupsaftertendaysofinjection:NCgroup(healthyC57micenormallyfed,n=6),HCC-Ngroup(emptyvectorcontrolgroupofmice,orthotopicmodelofhepatocellularcarcinomacells,n=6),andHCC-Lgroup(pEGF

8、P-lass2plasmidinjectedgroup,n=6).