氨氧化菌的分离及其氨氧化条件优化【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）氨氧化菌的分离及其氨氧化条件优化13目　录目　录I摘要III1引言12材料与方法22.1样品来源22.2培养基、试剂及使用方法22.3氨氧化细菌的富集与分离32.4菌株的鉴定42.5氨氧化活性影响因子分析42.5.1溶氧量42.5.2pH值42.5.3起始氨氮浓度42.6分析方法43结果与讨论43.1菌株的鉴定43.1.1菌落菌体形态鉴定43.1.2分子鉴定43.1.2.1功能基因鉴定43.1.2.216srDNA鉴定53.1.2.3AOB菌株分类学地位63.2菌株AOB-1氨氧化活性研究63.2.1溶氧量63.2.2pH

2、值73.2.3起始氨氮浓度74结论8致谢9参考文献10附录124213摘要：从舟山近海南美白对虾养殖池塘底泥样品中筛选到一株具有氨氧化功能的细菌，命名为AOB-1。菌株AOB-1好氧，革兰氏阴性，球状；菌落呈淡黄色、干燥、针尖状。16SrDNA序列分析表明，该菌株与NitrosomonaseutrophaC91T的相似性为100%，氨氧化功能基因-氨单加氧酶（amoA）比对也表明，该菌株与NitrosomonaseutrophaC91T的相似性为98%。在30℃，100r/min时，25mL-200mL培养基装量范围内装液量越少氨氧化率越高；最适p

3、H值为8，pH值大于或小于8时，氨氧化效率都明显受影响；氨氮浓度在1mg/L-200mg/L的范围内，氨氧化速率随氨浓度的升高而加快，在200mg/L-1200mg/L的范围内氨氧化速率基本保持不变，但当氨氮浓度高达2000mg/L时，其活性受到明显的抑制。因此，AOB-1菌株不仅对养殖水体，而且对高浓度氨氮废水的处理也具有潜在的应用价值。关键词：氨氧化细菌；亚硝化单胞菌；鉴定；氨单加氧酶基因Abstract:Astrainofammoniaoxidizingbacterial,AOB-1,wasisolatedfromthesedimentofc

4、oastalPenaeusvannameirearingpondinZhouShan,ZhejiangProvince.Itisaerobic,gram-negative,spherical;andthesinglecolonyislightyellow,dryandneedletip-like.Its16SrRNAgeneshows100%similaritywiththatofNitrosomonaseutrophaC91Tanditis98%similarwithNitrosomonaseutrophaC91Tinammoniamonooxy

5、genase(amoA).Ammoniaoxidationrateishigherwithmoremediainflasksintherangeof25mL-200mLmediaat30℃,100r/min.TheoptimumpHis8forammoniaoxidation.Therateofammoniaoxidationrisedwiththeincreaseofammoniumconcentrationintherageof1mg/L-200mg/L,remainedsameintherageof200mg/L-1200mg/L,andwa

6、ssignificantlyinhibitedwhentheammoniaconcentrationupto2000mg/L.Therefore,strainAOB-1isnotonlyusefulinthetreatingofaquaculturewastewater,butalsohasthepotentialapplicationinthefieldofindustrialwastewaterwhichhashighammoniumconcentration.Keywords:Ammoniaoxidizingbacteria;Nitrosom

7、onas;Identification;Ammoniamonooxygenase.131引言随着我国经济的迅速发展和城市化进程的加快，大量的工农业废水、生活废水排入天然水体中，造成水体富营养化速度加快，污染现象严重。根据环境监测总站的报道，我国大部分地表水和城市河道受到了不同程度的污染，氮素污染是引起水体污染的重要原因之一，而氮素废水的超标排放是水体富营养化的主要原因。水体的富营养化对人体的健康和水中生物都是非常有害的，因此去除废水中的氮素显得尤为重要。氮主要以NH4+、NO2—、NO3—等形式对水体造成污染，对氮素污染的治理方法有很多，而最经济且

8、对环境友好的方法当推生物脱氮了。传统生物脱氮是由好氧条件下的硝化作用与厌氧条件下的反硝化作用完成的。由于生物脱氮技术在很多