遗传学实验：三点测交

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1、遗传学实验王媛媛111140084生命科学学院拔尖班实验四果蝇的三点测交一、实验目的验证连锁互换定律，掌握并进行连锁分析，学习绘制遗传学图的原理和方法。了解伴性遗传与非伴性遗传的区别，了解伴性基因在正、反交中的差异。二、预备知识1、三点测交三点测交把三个基因包括在同一次交配中，即用三杂合体abc/+++或ab+/++c跟三隐性个体abc/abc测交。进行这种试验，一次就等于三次“两点试验”，而且带有另外两个优点。一次三点测验得到的三个重组值是在同一基因型背景、同一环境条件下得到的，而三次“两点试验”就不一定这样。重组值既受基因型背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以，只有从三点试验所

2、得到的三个重组值才是严格地可以互相比较的。通过三点测交试验，可以得到三次两点试验所不能得到的资料，即双交换的资料。果蝇的白眼、小翅、卷刚毛为X-连锁基因，全部隐性于各自的野生型基因（红眼、长翅、直刚毛），把白眼、小翅、卷刚毛雌蝇（wmsn/wmsn）与野生型雄蝇交配（＋＋＋/Y），F1雌蝇全部为野生型，雄蝇则全部表现为三隐性突变型，让F1互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌蝇中两个染色体之间发生了互换的结果，根据基因在染色体线性排列的遗传理论，对F2进行分析即可知不同基因间的连锁距离。因为这三个基因位于性染色体上，所以这个试验也可用来作

3、为伴性遗传试验。当基因位于X或Y染色体上时，一般不含相对的等位基因，产生伴性遗传，在正交和反交试验中产生不同的结果。2、连锁率和互换率生殖细胞形成过程中，位于同一染色体上的基因是连锁在一起，作为一个单位进行传递，称为连锁律。在生殖细胞形成时，一对同源染色体上的不同对等位基因之间可以发生交换，称为交换律或互换律。连锁和互换是生物界的普遍现象，也是造成生物多样性的重要原因之一。一般而言，两对等位基因相距越远，发生交换的机会越大，即交换率越高；反之，相距越近，交换率越低。因此，交换率可用来反映同一染色体上两个基因之间的相对距离。以基因重组率为1%时两个基因间的距离记作1厘摩（centimor

4、gan，cM）。基因座位很近，只发生一次交换，重组值＝交换率基因座位较远，可发生两次交换，重组值＜交换率4/4遗传学实验王媛媛111140084生命科学学院拔尖班基因图距就是通过重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重祖率与交换率的值相等，可以直接根据重组率的大小作为有关基因间的相对距离，把基因顺序地排列在染色体上，绘制出基因图。如果基因间相距较远，两个基因往往发生两次以上的交换，这是如果简单的把重组率看作交换率，那么交换率就会被低估，图距就会偏小。这时需要利用试验数据进行校正，以便正确估计图距。基因在染色体上的相对位置的确定除进行两个基因间的测交外，更常用的是三点测交法。3、并

5、发率和干涉如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换。那么预期的双交换频率应等于两个单交换频率的乘积。但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值。因为每发生一次单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一些，这叫做干涉。一般用并发率来表示干涉的大小。观察到的双交换率并发率=两个单交换的频率的乘积干涉率=1–并发率=1一、供试材料野生型黑腹果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性果蝇。二、器材药品解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶(4瓶/人)、乙醚、75%乙醇三、实验步骤①选三隐性雌性处女蝇（wmsn/wmsn）和野生型雄蝇（＋＋＋/Y）5～6对置于新鲜培养瓶中作正交，同时选野

6、生型雌性处女蝇（＋＋＋/＋＋＋）和三隐性雄蝇（wmsn/Y）同置于新鲜培养瓶中，作为反交，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，组别及姓名。☆各自带回宿舍，妥善保管，室温下培养。注意谨防瓶塞掉出、瓶子摔破，避开阳光直射，保暖。②自始自终进行果蝇生活周期的察看。写出观察日记：记录看到的果蝇行为，各发育阶段的主要现象及经历的时间等。③一周后，在实验室倒去亲本果蝇，一定要倒干净，一只也不能留。（此时瓶壁上应有黑色蛹)④二周后，F1蝇长出，实验室内观察F1雌蝇和F1雄蝇的各个性状，并观察正反交不同组合的结果如何。⑤取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，正交放三瓶，反交一瓶。⑥三周后，倒去F1，必须倒

7、干净，一只也不能留。4/4遗传学实验王媛媛111140084生命科学学院拔尖班⑦四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次（要求统计数量1000只以上），统计过的果蝇处死。应该统计的F2果蝇是正F2，但如果其数目不多，可借用反交中F2的雄蝇加以统计。⑧在表格中记录实验结果。一、实验结果记录及分析1、遗传图谱分析+++msn3wmsn3w×msn3wmsn3wmsn3w+++×（♂）♀（♂）♀msn3w+++msn3w+++msn