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时间:2020-01-11
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1、单核靠边期是组织培养中诱导单倍体植株的最佳接种时期。花粉粒的发育时期是其培养成功的主要因素之一,处于单核靠边期和二核期的花粉诱导效率最高。单核靠边期诱导率最高,单核中央期次之。就多数植物而言,单核中期至晚期的花粉最容易形成花粉胚。具体说是在小孢子发育的单核中期至单核靠边期,在此之前或之后都不易取得成功。被子植物为例,有小孢子四分体时期,单核期,双核期特点:小孢子四分体时期,4个单倍体细胞连在一起单核期,又分单核居中期和单核靠边期,进入单核期时,四分体的4个单倍体细胞彼此分离,形成4个具有单细胞核的
2、花粉粒,此时的细胞含有浓厚的细胞质,核位于细胞中央,即居中期,随着细胞不断长大,细胞核由中央移向细胞一侧,即靠边期双核期,细胞核移向一边后,分裂成1个生殖细胞核与1个花粉管细胞核,进而形成两个细胞,一个生殖细胞与一个营养细胞,生殖细胞会再分裂一次形成两个精子用于花药或花粉培养的供体植株,在生长条件下,从幼年的植株取出花药。由于花粉发育时期和花蕾的某些外部形态特征之间的大致的相关性,因此可以利用这些外部标志,去选择大致处于所需要时期的花蕾。但在实验中必须由每个花蕾取出一个花药,通过镜检确定花粉发育的
3、准确时期。在水稻中,以单核靠边期的花粉对诱导单倍体植株较为适宜,在外部形态上可根据叶枕距为5~15cm,颖片淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2这些条件鉴定。在取穗前先将旗叶鞘用70%酒精擦洗一遍。在超净工作台内剥去旗内鞘,取出稻穗,放入10%漂白粉溶液中消毒10min,换无菌水洗一次。在取花药之前用70%酒精将手擦洗两遍。取花药时左手持穗,右手用镊子从颖壳中取出花药,放在无菌培养皿中,待花药有一定数目时,用接种环将他们接种到培养基上。培养5天后,花药逐渐变为黑褐色,20天左右花药裂开,从中长出
4、淡黄色的花粉愈伤组织,以后先形成芽,后长出根,形成幼苗。烟草花药培养的最适取样期是花粉为单核期的花蕾,此时花蕾的花冠大约与萼片等长。芦笋花药培养的最适取样期也是单核期的花粉,花蕾长2~2.5mm,选取一级侧枝的花蕾较为合适,因为在一级侧枝的花蕾发育良好,数量大,发育同步。烟草花药消毒方法基本与水稻花药培养相同。必须注意整个操作过程中不应使花药受到损伤,若受到损伤,则应淘汰,因为损伤常常会刺激花粉壁形成二倍体的愈伤组织。花药培养的条件,一般是光照(12~18h,5000~10000lx,28°C)和
5、黑暗(12~16h,22°C)周期交替进行。(P106L.2~P107L.4)种子植物特有的结构,相当于一个小孢子和由它发育的前期雄配子体。在被子植物成熟花粉粒中包含2个或3个细胞,即一个营养细胞和一个生殖细胞或由其分裂产生的两个精子。在两个细胞的花粉粒中,两个精子是在传粉后在花粉管中由生殖细胞分裂形成的。在裸子植物的成熟花粉粒中包含的细胞数目变化较大,从1~5个或更多个细胞,其中有1~2个原叶细胞,是雄配子体中残留的几个营养细胞,形成后往往随即退化,在被子植物的雄配子体中已完全消失。花粉是由花药
6、发育来的,具体过程可以参考一下人教版新教材中选修一课本的37页。未成熟的花粉要经历下列过程才能变为成熟花粉:花药中的花粉囊里的一个小孢子母细胞----减数分裂---4个小孢子(小孢子的四分体时期)-----其中的一个小孢子----单核居中期---单核靠边期----花粉粒(双核期)(双核期是指一个花粉粒细胞中有2个细胞核,分别是花粉管细胞核和生殖细胞核)花粉粒细胞再经过一次有丝分裂成为营养细胞和生殖细胞,生殖细胞再经过一次有丝分裂成为2个精子(也就是成熟花粉)所以:一个小孢子母细胞经过减数分裂和一系
7、列变化和有丝分裂会形成8个精子
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