17181食品生物化学实验考试试题库 1

《17181食品生物化学实验考试试题库 1》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、17181食品生物化学实验考试试题库1本学期做过的实验中涉及物质含量测定的有几个，幷说出实验名称及其测定原理。答：有蛋白质含量、样品中的含糖量这两个；涉及蛋白质含量的试验有双缩脲法测定蛋白质浓度、紫外线吸收法和微量凯氏定氮法；样品中含糖量涉及的试验是总糖和还原糖的测定；双缩脲法测蛋白原理：具有两个或两个以上的肽键化合物特有双缩脲反应，在碱性溶液中与铜离子形成紫色配合物，在540mm处有最大吸收，在一定浓度范围内蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比，可用比色法定量测定。紫外吸收法原理：由于蛋白质中的酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸含有共轭双键，因此，蛋白质具

2、有吸收紫外光的性质，吸收峰在280nm左右。微量凯氏定氮法测定原理：凯氏定氮也称克氏定氮，样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化)，氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。总糖和还原糖的测定试验原理：还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3，5—二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3—氨基—5—硝基水杨酸，再过量的氢氧化钠碱性溶液中此化合物呈橘红色在540mm处，一定浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系利用比色法可测定样品中的含糖量。2、测定蛋白质含量的实验有哪

3、些？幷说明测定原理。答：紫外吸收法测蛋白质含量原理：蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸残基，使蛋白质在280nm处有最大吸收峰。在一定浓度范围内，蛋白质溶液280nm吸光度与蛋白质浓度成正比，可以用这一性质用作蛋白质定量测定凯氏定氮法测蛋白质含量原理：有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量.双缩脲：双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物，这一反应称为双缩脲反应3

4、、紫外吸收法测蛋白质含量与双缩脲法测蛋白质含量都使用了分光光度计，二者在使用方法上有何不同？幷指出这两种方法的优缺点？答：紫外吸收法测得是260nm和280nm的吸光度，本方法对测定微量蛋白质的测定即快又方便，它还适用于硫酸铵或其他盐类混杂的情况下，这时用其他方法测定则比较困难。此方法有时会产生误差。双缩脲法测蛋白质测得是540nm处吸光度，此方法最常用于需要快速但不要求十分精确得测定。硫酸铵不干扰此反应，铜离子容易被还原，有时会出现红色沉淀。4、使用分光光度计测物质含量时为什么要有空白管？对空白管所装物质有何要求？使用分光光度计测物质之外含有一样的组分

5、,以此来做标准,然后被测定样品吸收的单色光与之进行对比得到的测量数据。空白管装的物质一般是指不含被测物质或和被测样品除了被测物质之外含有一样的组分，以此来做标准5、为什么要调空白管的吸光值为零？怎么操作？空白也有可能会吸收部分光的，因此需要调零，以扣除空白的影响。先调T100%，再调A0%6、分光光度技术中透光率是什么？吸光值与透光率之间有何关系？对A值的范围有何要求？T是透射光强度（透过比色皿）与入射射光强度（还未过比色皿之前的光强度）之比。吸光度A=lg（1/T)=-lgT，A是透光率倒数的对数,即透光率的负对数，只有吸光度才与浓度呈正比A的值在0.

6、1~0.9之间7、标准曲线法测物质含量时，如果是求出相关方程，其中R2的是什么，对其有何要求？R2指的是相关系数，一般机器默认的是R2>0.99，这样才具有可行度和线性关系。一般要求将之开方成R后使用，不同精密度方法的R要求不一样，最好达到3个9，大于998也可以8、写出朗伯-比尔定律，幷指出各字母的含义。当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:A=abc式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm^3)，a为

7、吸光系数。其中吸光系数与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分（如溶剂等）对光的吸收可用空白液扣除。9、称取5mg淀粉酶粉配成10ml酶溶液，从中取出0.5ml，以20%淀粉为底物，用目视碘比色法测得分解20ml淀粉至终点色所需时间为4分钟；另取4ml酶液用凯氏定氮法测得氮含量为0.3mg。规定：每小时分解1g淀粉至终点色的酶量为1个活力单位。求出：（1）1ml酶液中所含的蛋白质量及酶活力单位数；36（2）比活力。不会10、总糖、还原糖含量测定中，总糖指的是什么？还原糖是什么？测定原理是什么？总糖：主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和

8、在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉.还原糖：从