【7A文】高中生物实验(超详细)

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1、【MeiWei_81-优质适用文档】高中生物实验总结实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布(必修一P26)一、实验原理:1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA大部分存在于细胞质中。2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。利用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。3、盐酸的作用①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;②盐酸使染色体中的DNA与

2、蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合4、0.9%的NaCl溶液作用:保持口腔上皮细胞的正常的形态二、目的要求:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法三、材料用具:人的口腔上皮细胞(也可用其他动物或植物细胞代替,如洋葱鳞片叶表皮细胞)大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂(取A液20mL,B液80mL配成染色剂,使用时现配。A液:取吡罗红甲基绿粉1g,加入100mL

3、蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用。B液:取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL。取稀释的乙酸钠溶液30mL和乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为4.8的溶液),蒸馏水五、方法步骤:1、取口腔上皮细胞制片①在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。(固定细胞)2、水解①在小烧杯中加

4、入30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。②在大烧杯中加入30℃温水。③将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。3、冲洗涂片用蒸馏水缓水流冲洗载玻片10s。4、染色①用吸水纸吸去载玻片上的水分。②将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min。③吸去多余染色剂,盖上盖玻片。5、观察①低倍镜观察:选择染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰。②换用高倍物镜观察:调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。六、考点提示:1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以

5、避免装片中出现太多的杂质;2、取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞;3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗;4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和

6、蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。【MeiWei_81-优质适用文档】【MeiWei_81-优质适用文档】2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人

7、体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类,脂肪或蛋白质的存在。二、实验目的:尝试用

8、化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。三、实验材料:1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果或梨匀浆。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子、花生种子匀浆为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的豆浆、鲜肝提取液。4、淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。四

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