资源描述：
《金龟子绿僵菌液体深层培养探究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、金龟子绿僵支体深层培养探究摘要对金龟子绿僵菌30103菌株在不同浓度吐温80.不同维生素液体培养基中进行液体深层培养研究，结果表明：不同浓度吐温80对液生分生鞄子的产量影响显著，培养基中吐温80含量在0.6%~1・0%时，可获最大产匏量；不同维生素对生物量和液生分生抱子的产量影响显著，在培养基中添加适宜维生素能有效刺激液生分生抱子的形成，复合维生素、B2B1B6.B6B1H能使绿僵菌获得较高的液生分生抱子产量。关键词金龟子绿僵菌；液生芽翘子；液生分生翘子；生物量中图分类号S476.12文献标识码A文章编号1007-5739(2013)08-008
2、8-02绿僵菌在液体深层培养中某些菌株能以微循环产鞄方式,即不经营养生长阶段，直接从液生芽抱子上形成液生分生抱子[1-2]o这种产电现象的发生与培养液的成分和条件密切相关，该文研究在液体培养基中不同浓度吐温80、不同维生素影响绿僵菌的微循环产抱进程。1材料与方法1.1试验材料1.1.1竝株。金龟子绿缰菌(Metarrhizziumanisopliae)30103o1.1.2培养液成分。①不同培养时间的培养液成分。碳素:蔗糖(25g/L),氮源:花生饼粉(15g/L),基础盐:KH2PO4(1.5g/LXMgSO4-7H2O(0.5g/LXCaCI
3、2(0.01g/L),微量元素：H3BO3(0.03mg/LXNa2MoO4-2H2O(0.05mg/L)、CuSO4-5H2O(0.08mg/L)、FeCI3-6H2O(0.5mg/L)，维生素:B1(15pg/gB6(100pg/gH(15pg/g),pH值6.5，吐温80浓度0.6%。②不同浓度吐温培养液成分。碳素：蔗糖(25g/L)，氮源：花生饼粉(15g/L),基础盐：KH2PO4(1.5g/LMgSO4・7H2O(0.5g/LCaCI2(0.01g/L),微量元素：H3BO3(0.03mg/LNa2MoO4-2H2O(0.0
4、5mg/LCuSO4-5H2O(0.08mg/LFeCI3-6H2O(0.5mg/L),维生素：B1(15pg/g>B6(100pg/gH(15pg/g),pH值6.5,吐温80浓度：0、0.05%、0.10%.0.20%,0.40%、0.60%、0.80%、1.00%,1.20%,1.40%o③不同维生素培养液成分。碳素：蔗糖(25g/L)，氮源：花生饼粉(15g/L),基础盐：KH2PO4(1.5mg/L)、MgSO4-7H2O(0.5mg/LCaCI2(0.01mg/L)，微量元素：H3BO3(0.03mg/L)、Na2MoO4-2
5、H2O(0.05mg/L)、CuSO4-5H2O(0.08mg/LFeCI3-6H2O(0.5mg/L),维生素:B1(15pg/gXB6(100pg/gXH(15pg/g),pH值6.5，吐温80浓度0.6%o维生素（15pg/g）:B1.B2、B6、C、H、B4、右旋泛酸钙、复合维生素、B2B1.B2B6、B6B4.B6右旋泛酸钙、B2B1C.B1B2B6.B2CH.B2B4右旋泛酸钙、B6B1C.B6B1H.B6CH、B6B4右旋泛酸钙、B2C、B2H、B6BKB6H。1.2接种培养1.2.1接种悬浮液制备。取供试斜面菌种分别加入含0.0
6、5%吐温80无菌水，用无菌操作的方法打散混匀，稀释并用血球计数板准确测定其含翘量达1x106个/mL用250mL的三角烧瓶装入49mL培养液灭菌入1mL抱子悬浮液,接种量为1x106个，设3次重复，恒温摇床培养，温度为（25±1）°C,振荡频率130r/min[3-4]01.2.2观察测定。接种后每隔12h用无菌吸管取样观察生长情况，有液生抱子出现且用血球计数板计数时进行计数（个/mL），生物量用于物质称量法测定（培养液过滤,120°C烘箱烘干2h后称重）[5-6]。2结果与分析2.1液体产物形成过程和形态振荡培养24h,电子开始萌发，原生质转移
7、到芽管生长点，芽管自抱子一端或二端或四周均有伸出。48h菌体呈网状，形成黄色菌团或散生。60h菌体出现产鞄结构，开始形成液生芽匏子，芽匏子呈长卵形。72h后芽砲子大量形成,部分芽鞄子以微循环产鞄方式，直接从芽鞄子上形成分生鞄子,液生分生抱子卵球形，与气生分生翘子有明显差异，此后液生分生抱子产量逐渐增加，120-144h达到最高产量。2.2不同浓度吐温80对生物量、液生抱子形成的影响表2为不同浓度吐温80培养液振荡培养144h后生物量及液生分生鞄子产鞄情况。经方差分析可知，吐温80对生物量影响不显著，F=0・54F0・01(9,20)=3.46。吐
8、温80对液生分生抱子的产量影响极显著，F=6.28>F0.01(9,20)=3.46，培养基中吐温含量在0.6%~1.0%日寸，有利于绿
