微生物课件 病毒和亚病毒因子

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1、第三章病毒和亚病毒因子重要名词1.烈性噬菌体：感染细胞后能在寄主细胞内增殖，产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体称为烈性噬菌体。2.噬菌斑形成单位（效价、感染中心数）：表示每ml样品中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。3.朊病毒：又称“普里昂”或蛋白侵染子，是一类不含核酸的传染性蛋白质分子，因能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的感应性构象变化，从而可使宿主致病。复习思考题1.什么是烈性噬菌体？试述其裂解性增值周期。烈性噬菌体：感染细胞后能在寄主细胞内增殖，产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体称为烈性噬菌体。①吸附噬菌体

2、尾丝散开，固着于特异性受点上。②侵入尾鞘收缩，尾管推出并插入到细胞壁和膜中，头部的核酸注入到宿主细胞中，而蛋白质衣壳留在细胞壁外。③增殖增殖过程包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构，以寄主个体及细胞降解物和培养基介质为原料，大量复制噬菌体核酸，并合成蛋白质外壳。④成熟（装配）寄主细胞合成噬菌体壳体(T4噬菌体包括头部、尾部),并组装成完整的噬菌体粒子。⑤裂解（释放）子代噬菌体成熟后，脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞裂解，从而释放出大量子代噬菌体。2.什么是效价，测定噬菌体效价的方法有几种？（5种）最常用的是什么

3、方法（双层平板法），其优点如何？效价：每ml样品中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。测定方法（5种）：斑点试验法、液体稀释管法、单层平板法、双层平板法、快速玻片法。双层平板法：精确且常用。加了底层培养基后，可弥补培养基底部不平的缺陷；可使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上，因而大小一致、边缘清晰且无重叠现象；又因上层培养基中的琼脂较稀，故可形成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。3.简述用双层琼脂平板发测定噬菌体效价的基本原理和主要操作步骤。基本原理：在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面，若接种上相应噬菌体的稀释液，其中每一噬菌

4、体离子由于先侵染和裂解一个细胞，然后以此为中心，再反反复复侵染和裂解周围大量的细胞，结果就会在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑。主要操作步骤：预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45℃以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基，在试管中摇匀后，立即到在底层培养基上铺平待凝，然后再37℃下保温。一般经10余小时后即可对噬菌斑计数。4.某微生物发酵厂发酵液和发酵状态出现疑似感染有噬菌体的异常情况，试讨论这些异常现象有哪

5、些？并设计一个简便易行的方法去证实之。现象：（1）发酵周期明显延长（2）碳源消耗缓慢（3）发酵液清淡（4）发酵产物形成缓慢或根本不形成（5）噬菌体检测会发现大量噬菌斑（6）电镜可见噬菌斑方法：噬菌体检测会发现大量噬菌斑、电镜可见噬菌体。5.病毒在基因工程中有何应用？试对其在动物、植物和微生物育种中的作用各举一例，并加以简单的说明点。在基因工程操作中，把外源目的基因导入受体细胞并使之表达的中介体，称为载体。除原核生物的质粒外，病毒是最好的载体。（一）噬菌体作为原核生物基因工程的载体：E.coli的λ噬菌体是一种含线性dsDNA的温和噬菌体

6、。在其基因组中，约有一半是对自身生命活动十分必要的“必要基因”，另一半则是对自身生命活动无重大影响的“非必要基因”，因此可被外源基因取代而建成良好的基因工程载体。（二）动物DNA病毒作为动物基因工程的载体SV40（猴病毒40），是一种寄生在猴细胞中的DNA病毒，能使实验动物致癌。其生活周期包括引起宿主细胞裂解和转化成癌细胞两个阶段。SV—DNA是一个复制子，当侵染其宿主细胞后，既能自我复制，也能整合在宿主的染色体上。（三）植物DNA病毒作为植物基因工程的载体花椰菜花叶病毒是一种由昆虫传播的侵染十字花科植物的病毒，含8kb的环状dsDNA

7、，存在多种限制性内切酶的切点。在其非必要基因区内插入外源DNA后，所形成的重组体仍具侵染性。但由于它不能与宿主核染色体组发生整合，因此还无法获得遗传性稳定的转基因植株。第四章微生物的营养和培养基重要名词1.光能无机营养型：以光为能源，无机物为供氢体，CO2为基本碳源的微生物光能有机营养型：以光为能源，有机物为供氢体，CO2及简单有机物为碳源的微生物化能有机营养型：以有机物为能源，有机物为供氢体，有机物为基本碳源的微生物化能无机营养型：有无机物为能源，无机物为供氢体，CO2为基本碳源的微生物2.单细胞蛋白：单细胞蛋白，也叫微生物蛋白，它是

8、用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。3.鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。4.伊