怎样选择色谱柱及流动相

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1、怎样选择高效液相色谱柱高效液相色谱柱怎样选择色谱柱现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。二、聚合物填料质等样品的分离非常有效。现在

2、的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。三、其他无机填料用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性，该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强，石墨化碳可用于分离某些几何导构体，又由但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强，应用范围受到一定的限制，所以未能广泛应用，度，其重要用途与优势尚在进行中。怎样选择填料粒度但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选择更小粒度的填料短的

3、色谱柱，以缩短分析时间，另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。一、如何保证良好的柱性能与柱寿命名称   别名      功能基团  正相 反相 离子对 应用Silica                     -OH           √                         非极性和中等极性以及非离子性有机化合物。SAS   C1             -(CH3)3               √                在

4、所有的烷基键合相中对非极性化合物保留最                                        弱，典型用于中等极性和多官能团化合物.Butyl  C4              -C4H9                 √    √       分离肽和蛋白质，保留时间比C8和C18短。MOS  C8，         -C8H17                 √    √      中等极性相中对中等化合物，小肽和蛋白质，          Octyl            

5、                                               极性药族化合物和环境样品。ODS  C18            -C18H37              √     √      烷基键合相中对中等极性化合物保留最强。广                                       泛用于药物，甾族化合物，脂肪酸和环境样品.CPS  CN,Cyano  -(CH2)3CN     √    √          对极性化合物有独特的选择性，适合应

6、用于正相(propyl                                                       分离，当用于反相系统时，其选择性与 C8和Nitrile)                                                       C18不同，在药学领域和复杂混合物的分离中应                                 用广泛。APS  NH2            -(CH2)3NH2    √    √       

7、  反相中分析糖类和其他极性化合物。弱阴离子交         (AminoPropyl)                                              换，阴离子和有机酸则应用缓冲剂和有机改性                                       剂做流动相。正相中与硅胶的选择性机改性剂                                       不同,分析芳香族效果很好。Phenyl                    -(CH3)C6

8、H5             √    √ 芳香族化合物Diol                        -(CH2)2O      √    √      反相时，分离肽和蛋白质。正相时，与硅选择                              CH2(CH2OH)2                                性相似,但极性较弱。SCX 强阳离子    -(CH2)2C6H4