藏药冬那端赤分子生药学探究

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1、藏药冬那端赤分子生药学探究摘要：目的对常用藏药冬那端赤进行分子鉴定。方法在民族植物学考察、经典分类学鉴定基础上，对植物核糖体DNA内转录间隔区(rDNAITS)序列进行测定与分析。结果确定西藏产冬那端赤的2种基源植物为玄参科婆婆纳属(VeronicaL.)狭果组(Sect.Stenocarpon)的毛果婆婆纳VeronicaeriogyneH.Winkl.>长果婆婆纳V.ciliataFisch.,其nrDNAITS序列分别为551、552bpo序列分析显示，以ITS序列为分子标记，可区别两者及其近缘种。结论nrDNA

2、ITS序列在藏药冬那端赤及其近缘种中具有很好的种间分辨率，可用于冬那端赤的分子生药学鉴定。关键词：藏药；冬那端赤；毛果婆婆纳；长果婆婆纳；分子生药学D0I：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.03.019中图分类号：R282.5文献标识码：A文章编号：1005-5304(2014)03-0065-04藏药冬那端赤具有清热解毒、消炎、止血、止痛、排脓、杀菌等功效，可治疗肝炎、高血压及血热、肝胆火旺等证，外用生肌愈创［1］。近年来，笔者开展了藏药的品种整理工作［2-4］o在实地考察中注意到，西藏所产

3、的冬那端赤至少涉及玄参科婆婆纳属(VeronicaL.)狭果组(Sect.Stenocarpon)的毛果婆婆纳VeronicaeriogyneH.Winkl.和长果婆婆纳V.ciliataFisch.o婆婆纳属国产61种，多数种类产于西南山地［5］。由于基金项目：国家自然科学基金面上项目(81173654)；上海市教育委员会预算内科研项目(2011JW11)通讯作者：赵志礼，E-mail：zhilzhao@sohu.com该属植物种类较多、共性特征明显，种内个体营养器官变化幅度较大，各地冬那端赤来源多样及传统鉴定方法的

4、局限性等原因，有必要深入开展该品种的整理与鉴定工作。随着分子生物学技术的快速发展，植物DNA序列被大量应用于中药品种的分子鉴定，其中植物核糖体DNA内转录间隔区(rDNAITS)序列的进化速率较快，可以提供较为丰富的变异位点，广泛应用于近缘属间、近缘种间的分子系统学研究及中药品种鉴别［6-9］o本研究在民族植物学考察、经典分类学鉴定基础上，采集婆婆纳属狭果组Sect.Stenocarpon毛果婆婆纳、长果婆婆纳，同属蚊母草组Sect.Alsinebe蚊母草、直立婆婆纳及婆婆纳组Sect.Omphalospora婆婆纳、

5、阿拉伯婆婆纳，玄参科玄参属玄参(外类群)的标本及实验样品，分别测定其rDNAITS序列，构建系统发育树，并评价该片段在冬那端赤分子生药学鉴定中的种间分辨率，以期为藏药冬那端赤DNA条形码的建立与品种鉴定提供基础资料。1材料与方法1.1标本采集材料分别于2012年4-8月采自上海、西藏，每个居群采集3份标本，同时取新鲜叶片，经硅胶快速干燥，备用。凭证标本经赵志礼教授鉴定，存放于上海中医药大学中药学院标本室。其中3份毛果婆婆纳V.eriogyne(CG12070301,CG12070302,CG12070304)样品来源于

6、西藏自治区藏医药研究院的拉萨蔡公堂藏药栽培基地，其种质来源于拉萨市墨竹贡卡县日多乡怎村。同科的玄参Scrophularianingpoensis用作外类群。见表1。